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目的和意义：肾缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury，IRI)是造成急性肾功能衰竭的主要原因之一，常见于机体大量失血、肾部分切除、肾移植以及肾实质切开取石等过程中。尽快恢复缺血区的血供是促进肾缺血损伤修复的关键，积极探讨肾缺血再灌注损伤后血管新生具有重要意义。国内外研究发现：HIF-VEGF信号通路和Notch信号通路对血管新生具有重要调控作用； Dll4为Notch配体之一，是一种重要的血管新生调节因子； VEGF高表达时可以促进下游基因Dll4和Notch1的表达上调；肾缺血再灌注损伤后会发生代偿性的血管新生。最新研究发现特异性的miR-210在组织缺血、缺氧后表达上调，通过调控其靶基因促进血管新生。我们推测：HIF-VEGF-Notch信号通路可能是肾缺血再灌注损伤后介导血管新生的主要信号调控通路；miR-210可能通过参与调控HIF-VEGF-Notch信号通路来促进血管新生。本研究通过制作小鼠肾缺血再灌注损伤模型，观察肾缺血组织中HIF-VEGF-Notch信号通路相关因子的表达变化，并探讨其在肾缺血再灌注损伤后血管新生中的作用，以期为缺血性肾损伤的临床治疗提供新思路。研究内容和方法：1、通过夹闭Balb/c小鼠双侧肾蒂45min来建立急性肾损伤模型。于肾缺血再灌注（IR）后4h、1d、3d处死小鼠，留取肾组织和血清标本待检。2、通过观察血清中肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）的变化和肾组织病理改变来判断急性肾损伤模型是否成功。3、采用实时定量RT-PCR法检测miR-210、HIF-1α mRNA、VEGFmRNA、Dll4mRNA、Notch1mRNA、Hes1mRNA的表达变化，采用Western Blot方法检测HIF-1α、Notch1、Hes1蛋白的表达变化。结果：1、急性肾损伤模型成功标志：肌酐（Cr）在IR后4h、1d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），分别为40.2±3.5μmol/L、90.00±3.81μmol/L；尿素氮（BUN）在IR后4h、1d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），分别为16.88±1.31mmol/L、38.86±5.11mmol/L；肾组织通过HE染色结果显示病理改变明显。2、肾缺血再灌注损伤后HIF-VEGF-Notch信号通路相关因子的表达变化：（1）实时定量RT-PCR结果显示：miR-210在IR4h、1d、3d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），分别为1.29±0.06倍、2.55±0.15倍、1.8±0.13倍；HIF-1αmRNA在IR4h、1d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），分别为4.57±0.52倍、3.15±0.46倍；VEGFmRNA在IR4h、1d、3d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），分别为4.33±0.22倍、3.35±0.22倍、2.51±0.20倍；Dll4mRNA在IR4h、1d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），分别约为4.31±0.38倍、2.77±0.36倍；Notch1mRNA在IR4h、1d、3d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），分别为6.65±0.28倍、4.53±0.23倍、2.37±0.24倍；Hes1mRNA在IR4h、1d、3d组均明显高于sham组（P<0.05），分别为3.4±0.24倍、5.58±0.28倍、2.27±0.16倍。（2）Western Blot结果显示：HIF-1α蛋白在IR4h、1d、3d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），HIF-1α/β-actin灰度比值分别为1.54±0.08、3.08±0.23、1.69±0.08；Notch1蛋白在IR4h、1d、3d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），Notch1/β-actin灰度比值分别为0.81±0.05、1.07±0.05、0.75±0.07；Hes1蛋白在IR4h、1d、3d组表达水平均明显高于sham组（P<0.05），Hes1/β-actin灰度比值分别为0.74±0.06、0.91±0.07、1.09±0.07。结论：实验结果表明，肾缺血再灌注损伤后miR-210、HIF-1α、VEGF、Dll4、Notch1、Hes1的表达变化发生显著上调。研究结果提示，肾缺血再灌注损伤后miR-210可能通过调控HIF-VEGF-Notch信号通路来参与血管新生的调控过程。