背景和目的:在中国,胃癌新发病例数和病死率高居第三位。目前,晚期胃癌患者的治疗选择和对预后的改善都十分有限,以化疗为基础,联合靶向Her-2或抗血管生成药物,副作用大、继发耐药多见。抗PD-1/PD-L1免疫治疗因其“广谱”低毒、获益持久,目前成为晚期胃癌的治疗选择之一。虽然初步结果令人鼓舞,但单药仅12%左右的总体客观缓解率和两项Ⅲ期KEYNOTE临床试验的阴性结果提示抗PD-1/PD-L1免疫治疗在胃癌的应用亟需寻找恰当的疗效标志物。目前临床应用最广的疗效标志物是基于免疫组化染色的PD-L1阳性联合分数（Combined positive score,CPS）≧1。然而,PD-L1检测结果与疗效不一致的现象使其预测价值存疑。研究发现,CMTM6/4是维持PD-L1细胞膜稳定表达的关键调节蛋白;能够在翻译后水平减少PD-L1蛋白的降解。而PD-L1在肿瘤细胞膜表面表达被认为与免疫治疗敏感相关。由此CMTM6/4可能和免疫治疗存在联系。本研究旨在探索CMTM6在胃癌中的表达特征、生物学功能、在胃癌中是否具有正向调控PD-L1的作用及可能的临床诊疗价值,尤其是免疫检查点阻断治疗方面。方法:本研究在细胞系水平进行CMTM6敲减和过表达实验分析其对PD-L1的调控作用,通过功能学实验探索CMTM6对胃癌细胞系生物学行为的影响并探索潜在调控CMTM6的外源性因子。通过多色免疫组化染色法（multiplexed immunofluorescence staining,MIS）检测胃癌组织芯片和免疫治疗患者疗前组织切片,分析CMTM6/4、PD-L1的表达特征和预后、临床病理特征的关系;以及与免疫检查点抑制剂疗效的相关性。结果:1.本研究通过多色免疫组化定量分析发现胃癌组织中上皮区CMTM6的表达高于癌旁组织,并观察到CMTM6与PD-L1共定位于肿瘤组织上皮区细胞膜的现象。胃癌中CMTM6高表达与PD-L1及肿瘤负荷、增殖指数Ki-67等临床病理特征呈正相关,是患者预后的独立危险因素。CMTM6+PD-L1+相比单因子CMTM6、PD-L1在预后预测上更具优势。通过体外增殖、克隆形成和迁移实验证实CMTM6在胃癌中发挥癌基因作用,促进胃癌的恶性表型。2.在细胞水平,通过多色免疫荧光检测到CMTM6与PD-L1在胃癌细胞系中存在细胞膜表面的共定位现象。通过CMTM6敲减和过表达实验证实无论是否有IFNγ的存在,CMTM6对PD-L1的细胞膜表达起调控作用。此外,葡萄糖、果糖、亚油酸等营养因子能调节CMTM6的表达,在胃癌细胞系中观察到PD-L1水平的同步变化,提示营养成分可能通过介导CMTM6、PD-L1的持续表达对免疫治疗产生不利作用。3.通过分析接受免疫检查点抑制剂治疗患者CMTM6/4、PD-L1的表达与免疫治疗疗效发现,接受anti-PD1/L1治疗前PD-L1相对高表达的患者,最佳疗效为疾病部分缓解（PR）组中上皮区CMTM6、CMTM6+CMTM4+水平显著高于疾病进展（PD）组,提示上皮区CMTM6+PD-L1+高表达可能富集免疫治疗的获益人群,而CMTM4无上述作用。通过对胃癌样本CMTM6/4、PD-L1的多色免疫组化表达模式进行分类,发现胃癌组织中上皮区CMTM6+PD-L1+与CK共定位是免疫检查点抑制剂的潜在疗效标志物。在抗PD-1/L1治疗队列中,EBV阴性、错配修复功能健全（proficient mismatch repair,pMMR）、anti-PD1 亚组分析提示,CMTM6 高表达的患者有生存延长的趋势,考虑到目前pMMR、EBV阴性亚组缺乏合适的标志物指导治疗,该现象值得进一步深入研究。结论:CMTM6是胃癌细胞系PD-L1膜表达的正向调控因子,与PD-L1在胃癌中存在共定位,CMTM6高表达是患者预后的独立危险因素,在胃癌中发挥癌基因的作用,其表达可能受营养成分的调节。CMTM6+PD-L1+高表达可能富集免疫治疗的获益人群。