耳蜗局部阻断NR2B受体拮抗水杨酸钠给药致豚鼠螺旋神经节细胞损伤的实验研究

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目的:通过圆窗龛局部给予特异性NR2B受体阻滞剂艾芬地尔(Ifenprodil),探讨阻断NR2B受体拮抗水杨酸钠致豚鼠螺旋神经节细胞损伤的作用。方法:将听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测结果小于40dBSPL的健康花色豚鼠共48只,随机分为4组,每组12只。Ⅰ组:空白对照组(腹腔注射生理盐水);Ⅱ组:人工外淋巴液组(artificialperilymph,APL)(左耳圆窗龛注人APL60μl,腹腔注射生理盐水);Ⅲ组:水杨酸钠给药组(左耳圆窗龛注入APL60μl,腹腔注射水杨酸钠); IV组:艾芬地尔给药组(左耳圆窗龛注入溶于APL的艾芬地尔10μmol/l,60μl后,腹腔注射水杨酸钠)。水杨酸钠注射量为400mg·kg-1·d-1,连续注射7天,停药后,将动物处死,取出每组动物左侧耳蜗。每组随机取6只通过免疫组织化学染色观察耳蜗螺旋神经节caspase-3表达情况。剩下6只行原位末端转移酶标记技术(terminal deoxynucleotidyltransferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay, TUNEL)法检测螺旋神经节细胞凋亡率。结果:给药前,各组动物ABR阈值检测结果均小于40dBSPL。给药后,各组动物左耳ABR阈值结果为: Ⅰ组:31.67±5.16dB SPL, Ⅱ组:33.33±5.17dBSPL, Ⅲ组:64.17±7.36dBSPL, IV组:49.17±5.85dB SPL。免疫组织化学染色显示,Ⅰ组和Ⅱ组螺旋神经节细胞中Caspase-3的表达量无显著差异,Ⅲ组及IV组螺旋神经节细胞中Caspase-3的表达量较Ⅰ组及Ⅱ组显著增高(P<0.01),IV组较Ⅲ组螺旋神经节细胞中Caspase-3的表达量明显降低(P<0.01)。TUNEL法检测螺旋神经节(SGN)细胞凋亡率: Ⅰ组和Ⅱ组SGN细胞凋亡率无显著差异,Ⅲ组及IV组中SGN细胞凋亡率较Ⅰ组及Ⅱ组显著增高(P<0.01),IV组较Ⅲ组SGN细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。结论:耳蜗局部特异性阻断NR2B受体可以拮抗水杨酸钠致豚鼠螺旋神经节细胞的损伤。
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