【摘 要】
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河南安阳是中国食管癌的高发地区,该课题组前期的工作表明,HPV16是安阳地区食管癌的重要发病因素,感染率与发病率及食管上皮病变程度密切相关,同时病变早期的细胞即有病毒整
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河南安阳是中国食管癌的高发地区,该课题组前期的工作表明,HPV16是安阳地区食管癌的重要发病因素,感染率与发病率及食管上皮病变程度密切相关,同时病变早期的细胞即有病毒整合迹象.病毒基因整合入细胞基因组时部分基因保留,某些基因丢失.在宫颈癌的研究中证明,细胞内病毒感染的拷贝数及整合入基因组与宫颈细胞癌变有关.为了进一步探讨高危型HPV16在细胞内的感染量及病毒整合量与安阳高发区食管癌发病的关系,我们采用荧光定量PCR(realtime PCR)的方法对安阳食管癌高发区"正常人群"的食管粘膜上皮细胞样品进行HPV16E6、E2两个基因感染量的检测.其中,E6基因作为HPV16病毒感染量的指标,E2基因与E6基因的比例作为HPV16病毒整合入细胞基因组DNA量的指标.当检测样本中的HPV16病毒以游离状态存在时,E6、E2基因的检测量应当相等.若样本中HPV16病毒发生整合,E2基因检测量将小于E6基因检测量.通过两个基因定量数值的比较,了解实验样本中HPV16病毒的感染量及病毒整合量.研究使用样本来自发病率存在明显差异的两个自然村,高发村为安阳县上庄村,发病率132/10万,低发村为内黄县付路村,发病率52/10万(以下简称为高发村和低发村).通过使用食管吞网取粘膜脱落细胞的方法进行收集样本,共221例,其中高发村174例,低发村47例.所有样本由安阳肿瘤医院病理科作病理诊断,其中高发村正常食管粘膜上皮59例、轻度增生75例、重度增生40例.低发村正常食管粘膜上皮21例、轻度增生22例、重度增生4例.所有样本均提取细胞DNA,先行常规PCR检测HPV16E6阳性率,再对阳性样本进行荧光定量PCR,同时检测E6、E2的量.通过该研究我们进一步证明:高危型HPV16感染确实与安阳食管上皮细胞癌前病变的发生有关;细胞内感染的病毒拷贝数越高,发生病理改变机率越大;整合可能发生在病毒感染的早期阶段;HPV16感染可能是该地区食管癌高发的重要病因因素.
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