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本研究主要采用蛋白印迹、抗体注射、激光共聚焦显微术和药物处理等方法对UPP在小鼠和猪卵母细胞减数分裂成熟、受精和早期胚胎卵裂中的作用及调节机制进行了研究。
本文检测了泛素蛋白在小鼠卵母细胞减数分裂过程及早期胚胎卵裂过程中的亚细胞定位。结果显示泛素蛋白主要集中定位在生发泡中、分离的同源染色体之间、原核内以及分离的姐妹染色单体之间。总之,我们的结果暗示,UPP在小鼠卵母细胞减数分裂恢复、纺锤体组装、极体排放和原核形成等过程中都起着重要作用,这些作用可能与UPP对细胞周期蛋白B1降解的调节和对MAPK/p90rsk磷酸化的调节有关。
本研究还探讨了UPP在猪卵母细胞减数分裂成熟、活化和早期胚胎有丝分裂中的作用及机制。利用次黄嘌呤维持的减数分裂阻滞模型,我们发现UPP抑制剂能够以剂量和时间依赖的方式促进裸卵和卵丘-卵母细胞复合体恢复减数分裂,即促进卵母细胞GVBD,UPP抑制剂还能够以剂量和时间依赖的方式促进MAPK/p90rsk磷酸化和细胞周期蛋白B1表达。
本文的结果提示依赖于UPP的securin的降解导致了Rec8的降解,这些过程对小鼠和猪卵母细胞减数分裂过程中的中后期转换过程是必须的结论。