鳜鱼、草鱼、斑马鱼早期高糖营养程序化对糖代谢调控的研究

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本文主要从鱼类早期营养程序化的观点出发,通过对三种食性鱼类斑马鱼(杂食)、草鱼(草食)、鳜鱼(肉食)的早期高碳水化合物的营养干预,来研究早期不同阶段高碳水化合物的处理对不同食性鱼体的生命后期阶段(幼年或成年)对碳水化合物的利用及代谢调控情况。1早期阶段高碳水化合物饲喂对成年斑马鱼葡萄糖代谢的程序化影响本研究的主要目的是通过在斑马鱼仔鱼时期,进行不同阶段短期饲喂高碳水化合物(60%麦芽糊精)饲料操作,以确定在早期对斑马鱼仔鱼进行高碳水化合物饮食刺激是否能够提高该鱼体成年后在碳水化合物利用率方面的长期持久性的代谢变化的可能性。我们选择了斑马鱼开口后的两个阶段进行高碳水化合物饮食处理:斑马鱼开口后处理3和5天以及卵黄囊消失后处理3和5天,共四个处理,对照组投喂普通的商品的饲料。研究发现,碳水化合物刺激能显著地在短期内增加开口处理组的体重。早期饮食干预对斑马鱼仔鱼糖代谢相关基因表达的调节各不相同。在开口后处理组(FF-)的GK(葡萄糖激酶),PK(丙酮酸激酶),AMY(淀粉酶),SGLT-1 (钠离子/葡萄糖协同转运蛋白)的mRNA表达和酶活都是上调的。四个实验组的G6Pase(葡萄糖6磷酸酶)的mRNA表达水平没有显著性差异,仅仅FF-5组的G6Pase酶活性显著低于对照组。PEPCK(磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶)基因的表达在实验组都是显著性下调。在实验最后检测阶段,发现早期营养干预对成年鱼体的生长性能没有影响。早期高碳水化合物处理可以降低成年斑马鱼的血糖水平。综合数据分析发现,斑马鱼经历了由混合营养期阶段到外营养阶段这一时期后对其生理功能的转变具有重要的影响。总之,目前的研究表明,早期营养程序化可能对成年斑马鱼的碳水化合物的消化、转运和代谢产生永久性的改变。2早期阶段高碳水化合物饲喂对草鱼幼鱼葡萄糖代谢适应性研究我们研究的主要目标是通过草鱼仔鱼期短期的操作(饲喂高碳水化合物),来分析草鱼幼鱼对碳水化合物利用的长期持续的代谢改变。我们选择了孵化后草鱼的两个摄食阶段进行高碳水化合物刺激。测定了生长,血糖,糖代谢相关关键基因的表达及肠道组织学形态。研究发现,通过草鱼生命早期阶段的高碳水化合物干预,可以促进早期仔稚鱼的生长,特别是FF-3组生长的可塑性可持续到幼年。而经过早期开口期的处理后,草鱼幼鱼调控自身血糖水平更加稳定,肝糖原存储能力有所提高,YE-7组和FF-10组肌糖原含量降低。在经历早期不同阶段高碳水化合物饲料饲喂条件后,草鱼幼鱼肠道形态也有不同的变化,四个实验处理组的肠道的黏膜褶皱变平且数量减少。早期阶段的处理使草鱼幼鱼GK和FAS(脂肪酸合成酶)基因在FF-3组的高表达。AG组一直摄食高碳水化合物饲料,可能导致鱼体营养不良,最后在糖代谢相关基因表达水平上一致很低。目前的研究表明早期敏感时期的高碳水化合物饮食营养干预可以诱导草鱼幼鱼对高碳水化合物利用的有效的适应和潜在能力。3早期阶段葡萄糖溶液对鳜鱼仔鱼生长和糖代谢的影响为了探讨一定浓度葡萄糖溶液对鳜鱼仔鱼的生长和葡萄糖代谢影响,将鳜鱼仔鱼分别于三个不同阶段在一定浓度葡萄糖溶液中养殖,观察其摄食行为,测定早期生长及糖代谢相关基因的表达量。结果发现,在生产中常常出现早期鳜鱼会随着仔鱼的生长由集群变为随机分散独立在水体各个角落的现象。而本研究中实验组在实验结束时仍然出现集群现象,这可能是葡萄糖溶液影响了其群体行为;在生长性能方面,三个实验组的体重和体长皆低于对照组,且FF-3组的体长显著性低于对照组(P<0.05)。在基因表达方面,FF-3组鳜鱼仔鱼的GK基因表达显著低于对照组,其他的基因无显著影响。而FF-5组鳜鱼仔鱼6个葡萄糖代谢相关基因:GK, PK, G6Pase, PEPCK, GS(糖原合成酶),FAS都是显著性高于对照组表达。YE-2组的所有基因的表达与对照组都没有显著性差异。综上所述,我们发现鳜鱼仔鱼经历了由混合营养期到外营养期过渡阶段后,其对葡萄糖代谢的相关基因的表达很活跃。4早期阶段不同开口饵料对草鱼幼鱼生长及糖代谢的影响为探讨开口饵料对草鱼幼鱼生长及糖代谢的影响,分别用高糖饲料(60%麦芽糊精)、商品饲料、浮游动物(以小球藻培育的轮虫为主)三种不同饵料在草鱼出膜1-10天生长期间作为开口饵料,短期阶段饲喂在10.3L的养殖缸中,处理阶段结束后移到350 L循环养殖系统,56天后取样,分析其对生长、血糖及糖代谢相关基因表达等的影响。研究发现,两组摄食饲料组的草鱼幼鱼生长性能较浮游动物组差(P<0.05),但是其GK的表达量显著低于其他两种饵料投喂组(P<0.05),其血糖和肝糖原含量与高糖饲料组无显著性差异;与商品饲料组相比,血糖水平、肝糖原含量在高糖饲料组均显著降低(P<0.05),而GK基因表达量显著提高(P<0.05),生长水平无显著差异。本研究表明仔鱼期开口阶段短期过量高糖饲喂可提高草鱼幼鱼糖代谢和糖利用的能力。
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