目的探究敲低PRMT2基因对乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药的机制。方法1.通过蛋白印迹法鉴定PRMT2 shRNA慢病毒载体。2.通过MTS术检测顺铂对乳腺癌MCF-7-NC和MCF-7-shPRMT2细胞的活性影响。3.在MCF-7-NC细胞及MCF-7-shPRMT2细胞(PRMT2低表达)中,加入不同浓度的顺铂(0μM、10μM、20μM)处理48小时后,通过流式细胞术检测低表达PRMT2对顺铂引起的乳腺癌细胞凋亡的影响。4.在MCF-7-NC细胞及MCF-7-shPRMT2细胞(PRMT2低表达)中,加入不同浓度的顺铂(0μM、10μM、20μM)处理48小时后,通过蛋白质免疫印迹法,从蛋白水平检测顺铂对乳腺癌MCF-7-NC和MCF-7-shPRMT2细胞中PRMT2、P-akt及P-ERK1/2表达的影响。结果1.成功鉴定PRMT2 shRNA慢病毒载体。2.MTS实验显示:相同浓度的顺铂对MCF-7-NC细胞的杀伤活性显著高于MCF-7-shPRMT2细胞(PRMT2低表达),敲低PRMT2能降低顺铂对MCF-7乳腺癌细胞的杀伤活性。3.流式细胞术显示:MCF-7-NC细胞系的凋亡率明显比MCF-7-shPRMT2细胞系(PRMT2低表达)高,有统计学意义(P<0.05),敲低PRMT2能降低顺铂对MCF-7乳腺癌细胞的凋亡率。4.WB结果显示:未加顺铂处理的MCF-7-shPRMT2细胞(PRMT2低表达)相对于MCF-7-NC细胞,PRMT2表达水平下调,P-akt表达水平上调,然而P-ERK1/2表达水平无明显变化。同时我们发现,用相同的顺铂浓度(10μM、20μM)分别处理后,MCF-7-shPRMT2细胞(PRMT2低表达)相对于MCF-7-NC细胞,PRMT2表达水平均下调,P-akt表达水平均上调。结论敲低PRMT2基因的表达增加顺铂对乳腺癌MCF-7细胞的耐药,其机制可能与Akt磷酸化水平上调有关。