渐增式脑血流重建模式在大鼠大脑中动脉闭塞模型中的建立与评估

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目的:急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)是我国成人致残和死亡的首位原因。时间窗内闭塞血管的再通治疗(溶栓或机械再通)是改善 AIS患者临床结局的重要手段,但部分患者血管再通治疗后出现症状加重甚至死亡,这可能与无效再通及缺血-再灌注脑损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)有关。本研究将针对 CIRI这一关键科学问题,建立一种新型的渐增式脑血流重建模式(gradual blood flow recanalization,GBFR),并试图证实一定时间窗内,GBFR模式优于传统的骤增式血流再通模式(sudden blood flow recanalization,SBFR),能更好的减轻CIRI这一假设。  方法:本研究拟纳入获得成功GBFR和SBFR干预的大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠各42只,包括MCA闭塞时间15min、30min和60min各14只。采用激光多普勒血流仪(Laser Doppler Flowmetry,LDF)监测MCA区域闭塞前后和再通后血流值。采用神经功能缺损程度的五级4分评分法评价再灌注24h后大鼠神经功能状况。应用TTC染色测定脑组织梗死体积、HE染色的病理损伤四级3分法评估脑组织病理损伤和Tunel法检测神经细胞凋亡。比较GBFR和SBFR两种干预在以上指标检测中的组间差异。  结果:MCAO大鼠的脑血流量在GBFR和SBFR再灌注前(23.2%±1.51% vs23.6%±1.60%)和后(100.7%±2.98%vs91.6%±3.36%)无显著差异,但脑血流量恢复形式上有明显不同(渐增vs骤增)。与SBFR相比,GBFR能够显著改善神经功能缺损程度(1.02,95%CI1.00?1.079 vs1.28,95%CI1.16?1.43;p<0.05)、减少脑组织梗死体积(0.029 vs0.156; p<0.001),减轻脑组织细胞凋亡损伤(凋亡阳性百分率均值为5.66 vs41.22, H-Score均值为5.67 vs41.43;p<0.001),特别是在闭塞30min、60min组中效果更明显(p<0.05),而在闭塞15min组之间无统计学差异。GBFR干预也显著减轻了脑组织病理损伤,包括神经元肿胀、空泡化、降解,炎性细胞浸润和神经元坏死(p<0.01)。  结论:与SBFR干预相比,GBFR能有效减轻MCAO大鼠的CIRI,包括减少神经功能缺损程度和脑组织梗死体积、脑组织病理损伤以及神经细胞凋亡,特别是对MCA闭塞时间稍长的大鼠效果更为明显。提示GBFR干预更适合处于血管开通治疗窗晚期的急性颅内大动脉闭塞患者。
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