目的 支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞等多种炎症细胞参与的慢性炎症。哮喘以慢性气道炎症引起的气道壁重建和非特异性气道高反应性为特征。 虽然环境因素在哮喘的发生、发展中有重要作用，但是哮喘有明显的遗传倾向。大量受累同胞对和家系研究证实哮喘的家族聚集性。通过基因组扫描连锁研究，发现一些基因和染色体区域与哮喘相连锁，支持哮喘多基因的特征。哮喘的易感性是受多个基因控制的，每个基因对哮喘的形成都在一定程度上起作用。 近年来，通过基因组扫描和连锁研究证实了许多哮喘易感基因。由于IL-4和IL-13在哮喘发生中起重要作用，它们的基因被认为是哮喘的重要候选基因。IL-4和IL-13都作用于IL-4受体的α链，因此IL-4受体α链对哮喘形成起重要作用，它的基因是哮喘候选基因。 细胞因子在哮喘炎症的发展中起重要作用。趋化因子是一种细胞因子，C-C趋化因子是一个亚群，研究表明趋化因子与哮喘有密切关系。近来研究发现人群中存在CCR5Δ32突变，CCR5基因存在32碱基缺失。CCR5Δ32突变可能与哮喘形成有重要关系。 为寻找哮喘相关基因，我们在中国北方汉族人群中对IL-4α受体Q576R等位基因和CCR5Δ32突变进行哮喘相关性研究。 材料与方法 本实验以哮喘家系和健康对照的外周静脉血中白细胞所含DNA为材料。采用阶氯仿法从哮喘家系和健康对照静脉血中抽提 DNA。采用几一4 a受体 Q576R等位基因引物扩增 PCR，PCR扩增产物长度为209 hP。如果基因型为R576型，则存在Pvul内切酶位点，可切割为 186hp和23hp两条片段。如果基因型为 Q576型，则不能被Pvul内切酶切开，仍为209hp长度。采用CCRSA32引物扩增PCR，扩增产物长度为276hP，如有A32突变，则存在ZMbP片段。采用聚丙烯酚胺凝胶电泳，检测PCR扩增产物与酶切产物，可以确定基因型。哮喘组与对照组基因频率的比较采用卡方检验，P＜o．05为差异有显著性。 实验结果 l．IL－4 a受体Q576R等位基因 哮喘家系组与正常对照组均扩增出209bpPCR产物片段。野生型表示为 QQ，突变型杂合子表示为 QR，突变型纯合子表示为RR。经内切酶消化，根据切割情况分出 QQ型对R型JR型。基因型分布状况为，在哮喘家系组中，RR型L 13％刀R型门．02助0Q型 80．85％；在哮喘患者组中，RR型 2．86防力R型 20啪，”型厂．14阮；正常对照组中未发现RR型，吸型16％，你型84％。基因频率分布状况为，在哮喘家系组中人等位基因频率10．64％，Q等位基因频率89．36％；在哮喘患者组中，R等位基因频率12．86％刀等位基因频率87．14％；在正常对照组中人等位基因频率8％对等位基因频率92％。哮喘家系组与正常对照组基因频率比较，P＞0刀5，差异无显著性。哮喘患者组与正常对照组基因频率比较，P＞O．05，差异无显著性。 2．CCRS 哮喘家系组扩增产物长度为276hP，正常对照组扩增产物长度为276hP，均不存在CCRSA32突变。 ·2· 讨 论 近二十年来，国际上通过基因组扫描、候选基因技术，确认哮喘是一种复杂的多基因遗传病。哮喘的发生、发展由宿主遗传易感性和环境暴露相互作用所决定。研究表明多个染色体上多个位点与其相关。染色体sq上有众多哮喘候选基因，主要位于5q31－33。染色体6P包含白细胞抗原区和TNF基因，它们是哮喘的候选基因。11＊＊4上6上7＊ 号等染色体上也发现哮喘候选基因。但不同种族研究结果有所不同。 IL－4由ThZ细胞和肥大细胞产生，是一种多效性细胞因子，调节从 IgM到 IgE的同型转化，是过敏性炎症的关键调节因子。连同 IL叫 一起，它是引导 IgE合成的主要细胞因子。IL－4受体包含两个亚单位：一个140kDa。亚单位，它结合IL－4并转导它的生长促进和转导活化作用；另一个是Y亚单位，为几个细胞因子受体所公用，它放大IL－4。受体的信号。这个受体复合物也是 IL一 13的同源功能受体。IL—4和 IL一 13的基因与哮喘相关c它们都用IL－4受体的。链门—4Ra）作为各自受体系统的一部分。编码IL－4受体a链的基因位于16号染色体短臂。IL－4R。基因被认为是重要的哮喘候选基因。最近，有研究显示几一4受体a链基因的R576等位基因与哮喘强烈相关。但也有不同的研究结果。由于哮喘的遗传学种族差异已被证实，我们在中国人进行了研究。我们发现在中国北方汉族人群中确实存在R576突变，但哮喘患者与正常人群的突变率没有显著差异。R576多态可能不是中国北方汉族哮喘患者形成哮喘的主要因素。R576多态可能与其他多态相连锁，进而影响哮喘的发生与发展。并且由于本研究样本量偏小，尚需进一步扩大样本量做深人研究。 趋化因子是一组吸引白细胞到达炎症处的低分子细胞因子。 ·3·C－C趋化因子是一个亚群，C－C趋化因子与巨噬细胞炎症蛋白（MIPV，MW－lp，MNTES这些蛋白?