目的：本研究旨在观察中药汤剂桃红四物汤直接作用于体外培养大鼠肝星状细胞（hepatic stellate cells，HSCs），对其凋亡的影响，以及桃红四物汤通过刺激大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells，MSCs）旁分泌细胞因子,进而在上述两种细胞组成的共培养体系中对大鼠肝星状细胞的凋亡产生的影响。　　方法：骨髓间充质干细胞的分离：在无菌条件下分离SD雄性大鼠股骨骨髓，采用贴壁培养法进行骨髓间充质干细胞培养、纯化和扩增，传代至第4代使用。大鼠肝星状细胞系（HSC-T6）复苏后传代使用。用6孔塑料细胞培养板，在半透膜(transwell insert)上层接种骨髓间充质干细胞(2×105cells/well),在下层接种大鼠肝星状细胞(2×105cells/well),建立上下双层细胞共培养体系，常规培养。实验分四个组：大鼠肝星状细胞空白对照组即大鼠肝星状细胞单独培养；大鼠肝星状细胞用药刺激组用桃红四物汤药液含量为10％、15%、20%的完全培养基，直接作用于大鼠肝星状细胞24小时；空白共培养组常规共培养；加药刺激共培养组用桃红四物汤药液含量为10%、15%、20%的完全培养基刺激大鼠骨髓间充质干细胞3小时后，将大鼠骨髓间充质干细胞与大鼠肝星状细胞共培养24小时。大鼠肝星状细胞直接用药组：以正常单独培养大鼠肝星状细胞作为对照，于倒臵相差显微镜下动态观察细胞形态，用噻唑蓝（MTT）法检测桃红四物汤对大鼠肝星状细胞的增殖抑制率。用逆转录PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法检测大鼠肝星状细胞的凋亡相关基因Bax mRNA和凋亡抑制基因Bcl-2 mRNA表达变化，DNA凝胶电泳（DNA Ladder）法检测大鼠肝星状细胞凋亡。加药共培养组：以正常空白共培养组作为对照比较。通过RT-PCR法和DNA Ladder法检测各组大鼠肝星状细胞的凋亡情况及骨髓间充质干细胞的肝细胞生长因子基因（HGF mRNA）表达情况，并用酶联免疫吸附（ELISA）法检测共培养上清液中肝细胞生长因子浓度。　　结果：MTT法检测，桃红四物汤直接刺激组，大鼠肝星状细胞表现出明显的增殖抑制（P<0.01），且呈现浓度依赖性，与空白对照组比较有显著性差异（P<0.05）。RT-PCR法检测，直接刺激组大鼠肝星状细胞的Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达与空白对照组比较，有明显差异(P<0.05），且随药物浓度升高而增减，加药刺激共培养组大鼠肝星状细胞的Bax mRNA和Bcl-2 mRNA表达与空白共培养组比较，有明显差异（P<0.05），且随药物浓度升高而增减，共培养各组间大鼠骨髓间充质干细胞的肝细胞生长因子基因(HGF mRNA）的表达差异无统计学意义（P>0.05）。DNA Ladder法检测，直接刺激组、加药刺激共培养组和空白共培养组中的大鼠肝星状细胞出现了明显的DNA Ladder条带，空白对照组的大鼠肝星状细胞未出现DNA Ladder条带。ELISA法检测，加药刺激共培养组上清液中HGF浓度与空白共培养组存在差异，但差异没有统计学意义（P>0.05）。　　结论：桃红四物汤直接刺激大鼠肝星状细胞,对其有抑制增殖及促进凋亡的作用。桃红四物汤还可能通过刺激大鼠骨髓间充质干细胞旁分泌一些细胞因子,进而在大鼠骨髓间充质干细胞和大鼠肝星状细胞共培养体系中促进大鼠肝星状细胞凋亡。