研究背景和目的:乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染是导致慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化以及肝细胞癌的主要因素,而肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)是启动这些肝脏疾病的是主要效应细胞之一。但是,关于HBV对肝星状细胞的直接调节作用的研究相对较少。因此,为了更好的了解HBV感染后导致的肝脏疾病发生以及免疫耐受形成的原因,探究HBV对肝星状细胞的影响是十分必要的。此外,单核/巨噬细胞作为肝脏内一类主要的固有免疫细胞,在抵御疾病和调节肝脏免疫方面具有重要作用。但是HBV作用下的肝星状细胞与单核/巨噬细胞之间发生的相互作用机制需要进一步研究。因此,探究HBV作用于肝星状细胞后对单核细胞的影响,对HBV感染后导致的免疫抑制以及肝脏纤维化的发生具有重要意义。方法:为了探究HBV对肝星状细胞的影响,我们在培养肝星状细胞时加入具有感染活力的HBVcc,通过免疫荧光技术来检测肝星状细胞中HBV感染情况。在HBVcc和HBs Ag作用下,通过q PCR技术检测肝星状细胞纤维化分子及细胞因子的基因表达水平。HBV与肝星状细胞培养产生的条件培养基作用于单核细胞,通过荧光标记和Transwell实验检测单核细胞的迁移能力。为了探究HBV处理的肝星状细胞对单核细胞影响,在HBV存在的条件下将肝星状细胞和单核细胞共培养,通过流式细胞仪检测单核细胞表面分子及效应分子的表达,通过阻断实验探究其作用机制。结果:首先,免疫荧光结果显示HBV不能进入肝星状细胞,即HBV不能感染肝星状细胞。其次,通过q PCR技术检测发现,HBVcc和HBs Ag均不能诱导肝星状细胞α-SMA、Col 1A1、MMP2和TGF-β等纤维化相关分子表达,但是通过TLR2/My D88/TRAF6/NK-κB信号通路诱导细胞因子CCL2、CCL5和IL-1β的表达,在基因和蛋白水平均有明显的增加。此外,HBV诱导肝星状细胞产生的条件培养基可促进单核细胞的迁移。流式细胞仪检测结果显示,HBV作用下肝星状细胞通过表达CCL2和CCL5上调单核细胞CD206和IL-10的表达,下调CD16、CD86和TNF-α的表达。最后,在肝星状细胞与单核细胞的共培养系统中,发现HSC激活性标志基因表达显著增加。结论:研究发现HBV既不能感染HSC,也不能直接激活HSC诱导肝脏纤维化相关分子的表达,而是在肝脏纤维化发生之前,HBV通过直接作用于HSC诱导细胞因子表达,促进单核细胞免疫调节分子的产生,从而激活HSC。我们的研究发现了HBV导致肝脏纤维化发生的新的作用机制,这为临床上HBV感染引起的肝脏疾病的治疗提供了新的理论依据。