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【背景】胃癌是常见的恶性肿瘤之一，其发病率在所有肿瘤中居第四位，死亡率居第二位，严重威胁着人类的健康。胃癌患者的预后较差，5年生存率较低。由于早期胃癌的症状不明显，患者就诊时胃癌常进入中晚期，且伴随着淋巴结或远处器官的转移。这是胃癌患者治疗失败和死亡的重要原因之一。因此，寻找与胃癌转移相关的关键分子对提高胃癌的治疗效果尤为重要。本研究所前期利用杂交瘤技术筛选出一系列特异性较高的胃癌相关单克隆抗体，其中MGb2-Ag与胃癌的转移密切相关。通过免疫共沉淀和质谱分析我们发现Coronin家族成员Coronin3是与MGb2-Ag相互作用的分子。Coronin家族成员参与了细胞骨架的重组、细胞伪足的形成和细胞运动；肌动蛋白细胞骨架存在两种形式，即球肌动蛋白（G-actin）和丝状肌动蛋白（F-actin）。其中F-actin核化又是细胞骨架重组的重要步骤，核化即几个蛋白单体先组装成多聚体，然后其他单体继续添加形成长纤维分子。由此我们推测，Coronin3可能通过影响肿瘤细胞F-actin核化进而影响肿瘤细胞侵袭性伪足形成，从而促进胃癌细胞迁移、侵袭和转移。本研究通过免疫沉淀技术发现F-actin核化相关蛋白Arp2是与Coronin3发生相互作用的分子。我们进一步发现Arp2在胃癌淋巴结转移灶中的表达明显高于原发灶，其在高转移潜能的胃癌细胞亚系MKN28-M中的表达水平亦显著高于低转移潜能的细胞亚系MKN28-NM及其亲本细胞MKN28。通过功能获得性和缺失性研究，我们证实了Arp2能够在体外显著促进胃癌细胞的迁移、侵袭和转移能力。本研究有助于深入阐明细胞骨架调节蛋白参与肿瘤转移的机制，为有效干预胃癌转移提供新的治疗策略。【目的】1、研究Coronin3在胃癌组织中的表达及与预后的关系；2、筛选可与Coronin3相互作用的F-actin核化相关分子；3、研究目标分子在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理参数的关系；4、研究目标分子对胃癌侵袭转移能力的调节作用；【方法】1.免疫组织化学检测Coronin3在胃癌和匹配癌旁组织中的表达情况并分析其表达与胃癌临床病理参数之间的关系；利用Kaplan-Meier方法绘制出生存曲线并分析Coronin3与胃癌患者预后的关系；2.采用免疫沉淀技术、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术和生物信息学分析筛选与Coronin3相互作用的F-actin核化分子，并通过免疫沉淀验证；3.采用免疫组织化学检测其在胃癌中的表达情况；分析目标分子的表达强度与患者临床病理参数间的关系；利用Kaplan-Meier方法绘制出生存曲线并分析其与胃癌患者预后的关系；4.采用westernblot和qPCR检测目标分子在各胃癌细胞系中的表达；构建目标分子的过表达质粒及siRNA，对低表达和高表达目标分子的胃癌细胞系分别进行瞬时转染，通过细胞划痕、Transwell侵袭实验等研究其在胃癌侵袭转移中的作用。【结果】1.Coronin3在癌旁组织中的阳性率为50.7%（38/75），在胃癌中的阳性率为68%（51/75）；Coronin3与胃癌患者的性别和年龄无关，但与胃癌的分化程度及TNM分期存在密切的相关性，且分化程度越低，TNM分期越高，其在胃癌中的表达越强；Coronin3的表达还与患者的生存时间具有相关性，Coronin3高表达的胃癌患者生存时间相对较短。2.选择胃癌高转移细胞系MKN28-M进行免疫沉淀，再经质谱及生物信息学分析获得了与Coronin3相互作用的分子——肌动蛋白相关蛋白2(Actin-relatedprotein2,Arp2)，匹配序列为GYAFNHSADFETVR。免疫沉淀技术检测提示这两个分子间存在相互作用关系。3.Arp2在胃癌中的阳性率为62.7%（47/75），在癌旁组织中的阳性率为21.3%（16/75）；其在原发灶的阳性率为52.5%（21/40），在淋巴结转移灶的阳性率为82.5%（33/40）；Arp2的表达与性别和年龄无关，但与胃癌的分化程度及TNM分期存在密切的关系，并且分化程度越低，TNM分期越高，其在胃癌中的表达越强；随着Arp2表达的增强，胃癌患者的生存时间逐渐缩短。4.Westernblot及qPCR实验结果均显示Arp2在胃癌高转移细胞系MKN28-M中的表达高于亲本细胞MKN28及低转移细胞系MKN28-NM，而在人永生化胃粘膜上皮细胞GES中呈低表达。下调MKN28-M中Arp2的表达可抑制细胞的体外迁移和侵袭能力；上调MKN28-NM中的Arp2则促进胃癌细胞发生迁移和侵袭。【结论】本研究发现Coronin3与胃癌患者的预后密切相关。通过蛋白质组学技术发现并验证了Arp2是与Coronin3相互作用的F-actin核化分子，其表达与胃癌的分化和TNM分期相关，在淋巴结转移灶中的阳性率高于原发灶。此外，Arp2还与胃癌患者的生存期相关，表达越高，生存期越短。Arp2在胃癌高转移细胞系MKN28-M中表达高于亲本细胞及低转移细胞系。下调Arp2可抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力，上调Arp2可促进细胞的迁移和侵袭。