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1.目的:本研究旨在通过给予Beagle孕犬腹腔注射一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME,观察新生犬生长发育及幽门环肌层厚度的情况,探索建立先天性肥厚性幽门狭窄(CHPS)犬动物模型。 方法:将4只成年受孕Beagle犬分为模型组和正常组,模型组为3只成年受孕Beagle犬,正常组为1只成年受孕Beagle犬。自分娩期前85天至分娩期前1天,模型组给予腹腔注射L-NAME,正常组给予腹腔注射等量0.9%氯化钠。模型组和正常组母犬产下的新生犬生后31天、38天、45天和52天分别称重,生后52天,选取模型组体重增长缓慢的新生犬和正常组新生犬各5只作为研究对象,外科手术取幽门组织作切片和HE染色后显微镜下测量近胃窦部幽门环肌层厚度。 结果: (1)模型组和正常组母犬用药期间均无死亡、流产及早产等不良反应。 (2)模型组产新生犬14只,正常组产新生犬5只,所有新生犬未发现有肢体发育异常情况。 (3)与正常组相比,模型组新生犬体重增长较缓慢,两组之间差异有统计学意义。 (4)与正常组相比,模型组幽门肌层明显增生肥厚,尤其以幽门环肌层为主,肌纤维排列紊乱。两组幽门肌厚度差异具有统计学意义。 结论:给予Beagle孕犬腹腔注射L-NAME可建立类似CHPS犬动物模型。 2.目的:了解神经元型一氧化氮合酶(nNOS)在幽门区的表达及其与先天性肥厚性幽门狭窄(CHPS)的关系,以进一步研究CHPS的致病机制。 方法:将4只成年受孕Beagle犬分为模型组和正常组,模型组成年受孕Beagle犬为3只,正常组成年受孕Beagle犬为1只。自分娩期前85天至分娩期前1天,模型组母犬给予腹腔注射NOS抑制剂L-NAME,建立CHPS犬模型。正常组母犬给予腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液,两组新生犬生后第31天、38天、45天及52天分别称重,生后52天,选取模型组中体重增长缓慢的新生犬和正常组新生犬各5只作为实验对象,外科手术取幽门组织作切片。HE染色后显微镜下测量近胃窦部幽门环肌厚度,免疫组化后运用图像分析技术分别测定nNOS表达的阳性面积(Area)、平均光密度(MD)和积分光密度(IOD)三项指标作定量分析,并与体重、幽门环肌厚度作相关性分析。 结果: (1)nNOS主要表达于幽门环肌和纵肌间的肠肌神经丛细胞胞浆内,模型组中nNOS染色阳性神经纤维表达的Area和IOD及MD均较正常组减少,差异具有显著性。 (2)模型组幽门组织中nNOS表达的IOD分别与该组体重、幽门环肌厚度做相关分析,结果显示,模型组nNOS的表达与体重呈正相关,与幽门环肌厚度呈负相关。 结论:给予Beagle孕犬腹腔注射L-NAME可抑制新生犬幽门区nNOS的表达,引起新生犬幽门肌层肥厚和生长发育迟缓。