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近年来，多不饱和脂肪酸二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid，DHA)的药理功能受到越来越多的关注。但作为药物，需要高纯度的DHA单体。本论文探讨了从卤虾(Artemia salina Linnaeus)蛋白粉中制备高纯度DHA乙酯及其抗肿瘤的作用。
制备实验主要步骤为：
(1)脂肪酸提取；
(2)脂肪酸乙酯化；
(3)乙酯的尿素包合；
(4)乙酯的硝酸银水法纯化；
(5)乙酯的超临界CO2(SC—CO2)精馏纯化。
卤虾蛋白粉原料中含26.2％的总脂肪酸及11.2％的DHA。采用酯：尿素—乙醇饱和溶液为1：15的包合比在-18℃下进行富集，将DHA乙酯含量提高至46.6％(得率为26.3％)。以不同浓度的硝酸银水溶液纯化尿素包合的乙酯，当硝酸银水溶液浓度为75％时获得纯度为97.94％的DHA乙酯(得率为32.7％)。用75％的硝酸银水溶液纯化未经尿素包合的乙酯获得纯度为97.92％的DHA乙酯(得率为31.5％)。在中试水平上采用SC—CO2精馏技术在精馏压力为13 MPa、温度梯度为35、45、55、65℃时获得了纯度为67.76％的DHA乙酯(得率为58.39％)。
本研究采用自行制备的高纯度DHA乙酯通过体外实验对其抗肿瘤作用机制进行了探讨。细胞增殖抑制实验表明75～135 μM/L 的DHA乙酯能显著抑制人结肠癌细胞SW1116的增殖，75 μM/L 和90 μM/L DHA乙酯使膜磷脂酰丝氨酸外翻(Annexin v/PI双染)的细胞数目显著增加；使细胞中总超氧化物歧化酶(SOD)活力升高而过氧化氢酶(CAT)活力下降：同时分析了细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力与一氧化氮(NO)含量的变化；实验还发现DHA乙酯处理导致细胞中MDA含量显著升高而GSH含量显著下降。这些结果表明DHA乙酯对SW1116细胞的作用可能与脂质过氧化有关。
然而，由于DHA乙酯抗肿瘤作用的确切机制还涉及多个环节和多种因素，有待于进一步的研究来阐明。