论文部分内容阅读
基于生物识别的高度专一性和检测信号的放大作用相结合的生物传感技术因其具有灵敏度高、选择性好、易于操作等优点,在临床诊断、生物分析、环境监测等领域具有广泛的应用前景。超氧自由基作为对人体损害很大的一种离子,和一些疾病的发生、发展以及机体的老化有着密切关系,因此受到了广泛关注。本工作致力于发展荧光和压电传感技术在超氧自由基等生命体相关物质的研究,对于开发新型生物传感技术和分析方法均有着重要的意义。主要完成研究工作:第一部分:利用自行合成的新型3’, 6’-对戊酰硼荧光素探针,结合超氧化物歧化酶(SOD)的选择性催化歧化反应特性,建立了一种超氧自由基(O2-?)的酶催化荧光分析方法。SOD催化黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶(XA/XOD)体系中的O2-?生成H2O2,使得荧光探针转换为强荧光的荧光素产物,从而实现对O2-?的荧光检测,检测线性范围为2.4×10-7 ~ 1.5×10-5 mol/L,显示了该方法具有较高的灵敏度和检测性能,为超氧阴离子的直接检测提供了一种有力的分析手段。第二部分:结合磁-金复合物纳米粒子的催化作用,发展了一种基于金沉积质量放大黄嘌呤压电传感技术。氨基化磁性纳米粒子与纳米金强静电结合形成的磁-金纳米复合物,在磁场作用下,吸附在石英晶振表面;同时,XA/XOD体系中的超氧自由基在纳米金的催化作用下还原氯金酸生成单质金,使其沉积在复合物纳米粒子上,从而引起晶振频率变化,实现对黄嘌呤的检测。结果表明,石英晶振频率的变化和加入黄嘌呤的浓度的对数有着很好的线性关系,线性范围为5.0×10-8 mol/L~1×10-5 mol/L,检测下限为2.0×10-8 mol/L。该方法具有高稳定性、高灵敏度、高选择性以及良好的可靠性等优点,有望应用于实际体系的检测。第三部分:利用氨基化磁性纳米粒子的特点,基于酶催化质量放大作用,发展了一种用于检测血吸虫抗体的压电免疫传感技术。本实验主要是用活化的磁性纳米粒子固定血吸虫抗原,再利用抗体和酶标二体特异性结合,最后利用酶催化底物和H2O2反应生成沉淀,引起晶振频率变化,从而实现对血吸虫抗体的检测。结果表明,石英晶振频率的下降值和固定的血吸虫抗体在10 ng/mL~100 ng/mL范围内有良好的线性关系,检测下限为8.6 ng/mL。该方法具有灵敏度高,检测快速,利于石英晶振的清洗等优点。