花生粕是花生仁经压榨提炼油料后的副产品,目前主要应用在饲料中,有时甚至作为废料扔掉。抗氧化肽作为一种天然抗氧化剂,具有较好的抗氧化性和安全性,吸引了越来越多的关注。因此,充分利用花生粕制备抗氧化肽是重要的研究课题,具有较高的应用价值。本文以花生粕为原料,利用筛选得到的枯草芽孢杆菌20029对花生粕进行发酵处理,得到了花生粕发酵液,通过响应面分析优化得到了制备抗氧化肽的最佳条件:pH值8、温度30℃、发酵时间49.5h,在此条件下,发酵液的DPPH自由基(DPPH?)清除率为63.28%。并对不同发酵时间的DPPH?清除率与多肽含量的相关性进行了研究,发现DPPH?清除率与多肽含量的相关性较好,P值为0.0010。利用超滤对花生粕发酵液进行了粗分离,分离效果较好,超滤后,发酵液的抗氧化性变化不大。采用DA201-C大孔吸附树脂对多肽进行了精制处理,发现吸附过程属于快速平衡吸附,动态吸附过程中,上样浓度、流速均对吸附的穿透点产生影响,热动力学研究发现,树脂对多肽的吸附符合Langmuir方程式,拟合相关系数均在0.98以上,利用25%～100%的乙醇对吸附后的树脂进行了洗脱,发现不同洗脱组分的氨基酸组成、分子量有较大差异,对不同组分的抗氧化活性进行了测定,发现75%乙醇洗脱组分(PMFH-75)的活性最强。利用凝胶过滤、半制备RP-HPLC对PMFH-75进行了分离纯化,PMFH-75经凝胶过滤分为4个组分,其中F3的DPPH?清除率显著高于其他三个组分,并利用LC-MS对F3中的抗氧化多肽的组成和结构进行了分析。最后对发酵后的残渣的成分进行了分析,在氨基酸组成方面,同花生粕原料进行了比较,发现残渣中的Arg的含量降低,Met的含量增加,蛋白质的营养价值得到一定程度上的提高。