PCDH20基因在鼻咽癌中的功能及机制研究

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目的:原钙粘蛋白20(protocadherin20),也被称作原钙粘蛋白13,属于原钙粘蛋白超家族的一员。原钙粘蛋白20基因位于染色体13q21.2位置。我们前期的研究证实了PCDH20作为一个抑癌基因在鼻咽癌中起作用,本实验为进一步对PCDH20基因在鼻咽癌细胞株功能中的研究,以及对其相关机制的研究奠定基础。方法:细胞克隆技术检测细胞增殖能力。采用细胞转染技术,流式细胞术分析细胞生长周期,细胞划痕及Transwell小室实验分析细胞侵袭及迁移率。应用Western Blot及细胞免疫荧光检测PCDH20及其相关机制蛋白的相对表达水平。结果:转染PCDH20后,细胞周期在G1期停滞较多,且与周期相关的特征性蛋白CCND1表达下调,P21表达升高。转染PCDH20后,CNE-1细胞的克隆形成能力、迁移及侵袭能力明显降低。转染PCDH20后,CNE-1细胞通过对Wnt/β-catenin信号通路起抑制作用,从而在基因水平上抑制细胞增殖。结论:本研究发现,与对照组相比,转染PCDH20的CNE-1细胞组中细胞周期停滞在G1期明显增加,增殖减慢,且与细胞有相关性的周期蛋白CCND1表达降低,P21表达升高。这提示PCDH20基因可抑制鼻咽癌CNE-1细胞增殖,通过我们进一步的实验表明,PCDH20能拮抗WNT/β-catenin信号通路,导致通路下游基因:p-GSK-3β﹑C–Myc﹑CCND1﹑CD44蛋白表达下调,β-catenin从细胞膜向细胞核转移。同时细胞迁移及侵袭能力减弱。从而证明PCDH20基因的失活在鼻咽癌发生发展中起着重要的作用。
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