【摘 要】
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目的：应用化学合成的siRNA在体外抑制人脑膜瘤细胞HER2基因的表达，探讨化学合成的siRNA介导的RNAi在脑膜瘤基因治疗的可行性。方法：从新鲜无菌脑膜瘤组织中提取出原代细胞进行培
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目的：应用化学合成的siRNA在体外抑制人脑膜瘤细胞HER2基因的表达，探讨化学合成的siRNA介导的RNAi在脑膜瘤基因治疗的可行性。方法：从新鲜无菌脑膜瘤组织中提取出原代细胞进行培养，并人工纯化、传代。选取免疫细胞化学法鉴定为HER2蛋白表达阳性的脑膜瘤细胞，设计并合成针对HER2基因的小分子干扰RNA，选用阳离子脂质体Lipofectamine2000作为转染试剂,同时设立空白组、空载体组、非特异性siRNA组、及HER2siRNA组；应用脂质体转染法将siRNA导入纯化的脑膜瘤细胞内，48小时后免疫细胞化学法检测转染后各组脑膜瘤细胞中HER2、Ki-67蛋白的表达。结果：经EMA、Vimetin、HER2免疫细胞化学检测，HER2阳性表达的脑膜瘤细胞原代培养取得成功，经过转染后免疫细胞化学检测显示HER2siRNA组较空白组、空载体组、非特异性siRNA组的HER2、Ki-67蛋白表达明显下降(P<0.01)；而空白组、空载体组、非特异性siRNA组的HER2、Ki-67蛋白表达无明显变化（P>0.05），采用Spearman等级相关分析,提示脑膜瘤细胞中HER2蛋白表达与Ki-67LI呈正相关（r_s=0.616，P<0.001）。结论：(1)成功进行脑膜瘤细胞的原代培养；并认为脑膜瘤细胞的RNAi及体外药物实验应在第三代即开始进行。(2)在体外实验中，化学合成的特异性siRNA通过RNAi可有效抑制人脑膜瘤细胞HER2蛋白表达。(3) HER2基因沉默后，脑膜瘤细胞ki-67蛋白明显降低，脑膜瘤细胞的增殖能力下降，提示通过RNAi技术有望成为HER2过表达脑膜瘤基因治疗的一种新途径。
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