弓形虫病是由刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的一种人畜共患寄生虫病,广泛的分布于世界各地。弓形虫对宿主无严格的选择性,在众多温血动物及人群中广泛存在。猫科动物为弓形虫的终末宿主也是重要的传染源,哺乳类、鸟类都是其中间宿主。弓形虫作为一种细胞内寄生的机会性致病原虫,对免疫功能不全者及妊娠动物的危害严重。猪感染了弓形虫病后造成大量死亡,造成怀孕母猪流产、早产、死胎、畸形胎等,对猪场危害严重。本研究利用生物信息学进行分析,对猪弓形虫诊断抗原进行了筛选,目的是为了寻找和确定弓形虫高免疫原性的蛋白质,建立一种快速灵敏的弓形虫病诊断方法。本实验在确定弓形虫分泌蛋白质的基础上,将筛选出的基因克隆到表达载体,表达出2个重组蛋白质。通过亲和层析法纯化得到His标签重组蛋白质和GST标签重组蛋白质。利用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹法（Western-blot）筛选出了 TGME49_<sub>223140基因重组蛋白质的特异性单克隆抗体,通过间接免疫荧光（IFA）确定抗原在虫体上的表达部位。最后,以该重组蛋白质作为抗原,利用ELISA方法对54份疑似感染弓形虫的猪血清进行了检测,检出率为98.15%,结果与标准检测方法具有非常好的吻合。高抗原的确定对建立弓形虫病临床检测/诊断方法具有重要意义。