研究背景:胃癌是世界上常见的恶性肿瘤之一。目前在我国胃癌早期诊治率低,中晚期胃癌往往无法手术根治,且术后的放化疗显示出较强的抵抗力,所以胃癌过继转移治疗成为国际上研究的新热点。CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+regulatory T Cell)是一种具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,能够抑制肿瘤免疫,在过继性细胞免疫治疗的过程中,回输的免疫细胞包含一定数量的调节性T细胞。据此,如何通过降低调节性T细胞来提高目前细胞过继性免疫治疗的疗效,此问题亟待开展研究。　　 研究目的:本研究旨在通过化疗药预处理后的PBMCs,以标准CIK细胞培养程序扩增细胞,探索降低调节性T细胞增强免疫治疗疗效的方案,为临床治疗提供一定的依据。　　 研究方法:1)取5名健康成年人及11名胃癌患者的外周血PBMCs,以标准CIK细胞培养程序扩增CIK细胞,检测培养前后调节性T细胞的比例变化。2)取7名胃癌患者外周血各20ml分离PBMCs,选择三种化疗联合用药方案(DCF、ECF和FOLFOX方案),分别处理PBMCs20小时后,洗脱化疗药,测量各组化疗方案处理前后调节性T细胞的比例变化,然后继续以标准CIK细胞培养程序扩增。3)培养至第9天,用MTT法测量各组细胞增殖情况,并于第14天以流式细胞术检测扩增后CIK细胞的表型；以ELISA方法检测细胞培养上清中IFN-γ、IL-10的分泌情况,及用乳酸脱氢酶释放实验检测各组细胞毒性,以综合评估各组免疫活性细胞的功能状态。　　 研究结果:1)健康人或胃癌患者PBMCs,经标准CIK细胞培养程序至14天均可观察到调节性T细胞比例显著降低,与培养前(健康组:1.492±0.36％；胃癌组:2.33±0.66％)相比差异显著分别为健康组(0.874±0.31％)、胃癌组(1.29±0.53％)。2)不同浓度化疗方案处理结果显示:高剂量化疗药处理后第4天淋巴细胞基本死亡,无法继续培养和检测。低剂量化疗药处理后,FOLFOX方案能够降低调节性T细胞的比例,与对照组相比差异显著,而DCF、ECF方案虽有降低调节性T细胞比例的趋势,但差异不显著。3)低剂量化疗药预处理的三个方案组与对照组相比CD3+CD56+T细胞比例无差异,细胞增殖活性降低；而IFN-γ分泌增加、IL-10分泌减少,CIK细胞毒性降低。　　 研究结论:1)胃癌患者外周血PBMCs经标准CIK细胞培养程序扩增后,能够显著降低其中调节性T细胞的含量。2)低剂量化疗药预处理PBMCs后培养的CIK细胞,其调节性T细胞降低并能明显增加CIK细胞IFN-γ因子的分泌、减少IL-10的分泌,CIK细胞增殖活性,细胞毒性显著下降,本次实验说明化疗药物可以作为过继免疫治疗的辅助治疗手段,选取最适量的化疗药物浓度对肿瘤患者进行治疗,降低免疫抑制细胞的比例的同时,又最大限度保持患者免疫状态,结合细胞过继免疫治疗,可能是今后生物治疗联合化疗药物治疗肿瘤的新思路。