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子宫内膜癌在女性恶性肿瘤中发病率居第四位，其发生机制未明。同源盒基因（homeobox gene，以下简称HOX）家族是一类含有180bp的DNA序列的基因家族，此序列在进化上高度保守，编码一类特殊的转录因子。此类转录因子在调控胚胎发育，组织分化等发面发挥了重要作用，人类同源盒基因至少包含39个，分为A、B、C、D四簇，既往研究认为，同源盒基因HOXA9，HOXA10，HOXA11分别调控苗勒氏管分化为输卵管，子宫，宫颈。在正常月经周期中，HOXA10基因在调控子宫内膜的规律性增殖，分泌，剥脱等方面发挥了关键作用。近年来，有研究认为同源盒基因在一些肿瘤中存在异常表达。人类同源盒基因HOXA10也在一些肿瘤中存在异常表达。我们既往报道了HOXA10基因在子宫内膜癌中表达降低，增强HOXA10基因在子宫内膜癌中表达可以抑制细胞侵袭。细胞周期事件是细胞生物学的重要研究课题，细胞周期抑制能力的丧失和无限增殖能力的获得，是肿瘤细胞快速进展的特点。细胞周期相关的基因在肿瘤中常存在异常表达，调控这些基因异常表达的具体分子机制也一直是肿瘤学的研究热点。作为经典的细胞周期依赖性激酶（cell cycle dependent kinase，以下简称CDKs）的抑制因子，p21WAF1/CIP1基因(以下简称p21)被广泛的研究。既往研究报道：p21基因在子宫内膜癌中存在低表达。但是否p21基因与HOXA10基因在子宫内膜癌中的表达具有相关性，HOXA10能否调控p21基因表达和影响子宫内膜癌细胞周期，目前尚无明确报道。因此，本研究旨在同时检测HOXA10及p21基因在子宫内膜癌中的表达，统计学分析其相关性，通过构建HOXA10真核表达质粒和HOXA10-siRNA（HOXA10-small interference RNA）,进而增强和抑制HOXA10基因在子宫内膜癌中的表达，探讨HOXA10基因调控p21基因的表达及是否影响子宫内膜癌细胞周期。本研究可望进一步阐明HOXA10调控子宫内膜癌发生发展的分子机制，为寻找子宫内膜癌的生物靶向治疗提供依据。第一部分HOXA10基因与p21基因对子宫内膜癌中表达及意义目的:检测子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中HOXA10与p21基因的表达水平。探讨HOXA10基因及p21基因在子宫内膜癌中表达的意义。方法：提取正常子宫内膜癌组织，子宫内膜癌组织中的总RNA和总蛋白，采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR）及实时定量聚合酶链反应（Real-Time polymerase chain reaction，Real-Time PCR）检测正常子宫内膜及子宫内膜癌组织中HOXA10及p21基因的表达，Western blot检测HOXA10蛋白在正常子宫内膜及子宫内膜癌中的表达水平。Pearson相关性分析研究HOXA10与p21基因表达的相关性。结果：与正常子宫内膜相比，HOXA10基因在子宫内膜癌中表达降低（P<0.05），且随着肿瘤组织学等级升高，HOXA10蛋白表达呈明显降低。p21基因在子宫内膜癌中也呈现表达下调(P<0.05)，HOXA10基因与p21基因在正常子宫内膜及子宫内膜癌中的表达存在正相关(r=0.4445,P<0.01)。结论：HOXA10及p21基因在子宫内膜癌中表达降低，HOXA10基因随着肿瘤组织学等级升高，HOXA10表达呈下降趋势。HOXA10基因与p21基因表达存在正相关。第二部分HOXA10对子宫内膜癌细胞株p21基因的调控及细胞周期的影响目的：研究HOXA10基因对子宫内膜癌细胞株（ishikawa，KLE）中p21基因表达的调控作用及对子宫内膜癌细胞周期的影响。方法：1.使用PCR法克隆HOXA10基因CDS区，将HOXA10基因CDS区克隆至pcDNA3.1(+)内，构建含HOXA10基因的真核表达质粒。2.通过细胞转染技术，将HOXA10真核表达质粒转染至子宫内膜癌细胞株中，运用RT-PCR、Real-Time PCR及Western Blot方法检测增强表达HOXA10基因后，p21基因的表达改变，运用流式细胞技术（FCM）检测子宫内膜癌细胞周期改变。3.运用小干扰RNA（siRNA）技术，干扰HOXA10基因在子宫内膜癌细胞中的表达，运用RT-PCR、Real-Time PCR及Western Blot方法检测沉默HOXA10基因后，p21基因表达改变。结果：1.基因测序结果显示：HOXA10基因真核表达质粒构建成功。重组质粒能够在细胞中准确的转录，翻译出HOXA10基因mRNA和蛋白。2.在子宫内膜癌细胞株中，增强HOXA10基因表达后，p21基因mRNA及蛋白表达上升。子宫内膜癌细胞周期被抑制于G1期。3.在子宫内膜癌细胞株中，干扰HOXA10基因表达后，p21基因mRNA及蛋白表达下降。结论：HOXA10基因可以调控p21基因的表达并影响细胞周期改变。