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目的: 该研究针对温州地区甲型血友病(HA)家系，首先进行直接基因诊断，然后根据可变数目串联重复序列(VNTR)多态性、短串联重复序列(STR)多态性和限制性片段长度多态性(RFLP)进行间接基因诊断，为基于HA症状前、携带者基因诊断结果的遗传咨询和生育指导提供依据。 方法: 针对5例HA先证者，首先根据HA先证者的FⅧ促凝活性(coagulation factorⅧactivity，FⅧ∶C)测定结果，对HA先证者进行分型。采用倒位位移PCR(IS-PCR)进行凝血因子Ⅷ(FⅧ)inv22、de122、dup22、inv1的检测。然后进行单体型基因连锁分析。采用PCR检测FⅧ基因外的DXS52(St14)位点的VNTR多态性，检测FⅧ基因外的DXS15(CA)n、DXS9901(GT)n、DXS1073(GT)n位点和内含子1(GT)n、13(CA)n、22(GT)n(AG)n、24(GT)n位点的STR多态性并经毛细管电泳确证。另外采用PCR产物限制酶切检测FⅧ基因的内含子18、19、22位点的RFLP多态性。 结果: 根据国际一期法对HA先证者进行FⅧ活性的测定结果显示，这些HA先证者的FⅧ活性均小于1％，根据临床分型均为重型HA。以其中4个HA家系为例报道研究结果。家系三的先证者为远端Inv22患者，先证者母亲为远端inv22携带者，先证者父亲为正常者。先证者、先证者母亲、先证者父亲均未发生de122或dup22，并且均未发生inv1。家系二先证者外婆肯定不是携带者，先证者的X染色体来自外公，但已知外公不是患者，那么按照最大风险估计，母亲的那条来自外公的X染色体在外公生殖细胞中FⅧ基因发生了突变，母亲是携带者，先证者年幼妹妹是携带者，将来有生育患儿的风险。大姨及其女儿不是携带者。家系四先证者的致病X染色体来自其母亲，其母亲为携带者，年幼弟弟肯定为正常人。先证者外婆为携带者，先证者外公正常。先证者小姨肯定为携带者（尽管后代未曾有患者），先证者小姨年幼儿子肯定为正常人。家系五先证者外婆肯定不是携带者，先证者的X染色体来自外公，但已知外公不是患者，那么按照最大风险估计，母亲的那条来自外公的X染色体在外公生殖细胞中FⅧ基因发生了突变，因此母亲是携带者。 结论: 该研究的HA家系的直接和间接基因诊断，特别是对症状前男孩的诊断、对未曾有患病后代的女性携带者的检出，具有非常重要的实际意义，可以为遗传咨询和生育指导提供可靠依据。