压力对增生性瘢痕细胞周期相关基因干预作用的研究

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目的:探讨压力疗法对不同时间增生性瘢痕(hypertrophic scar, HS)成纤维细胞的细胞周期相关基因P57kip2;和CyclinE的影响,同时结合对瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的观察,为压力治疗增生性瘢痕提供理论依据。方法:临床手术采集治疗组瘢痕和对照组瘢痕各20例及正常皮肤5例。根据时间各分四个阶段:3个月、6个月、12个月和24个月。利用荧光定量PCR检测技术观察各组中p57kip2和CyclinE的mRNA的表达水平。同时对各组进行PCNA增殖细胞核抗原和TUNEL法凋亡细胞检测并计数及Masson法的观察胶原蛋白改变并进行相关统计学的分析。结果:(1)P57kip2的mRNA表达:对照组和治疗组,随着时间的发展其成纤维细胞中P57kip2的mRNA表达是由弱变强;在3个月,6个月及12个月时,治疗组P57kip2的表达高于对照组(P<0.05);24个月时,治疗组和对照组表达无差异(P>0.05)。各组内部,3个月比6个月表达量低(P<0.05);3个月和6个月分别与12个月,24个月及正常皮肤比较表达明显降低(P<0.05);12个月,24个月和正常皮肤比较无差异(P>0.05)。(2) CyclinE的mRNA表达:对照组和治疗组,随着时间的发展瘢痕成纤维细胞中CyclinE的mRNA表达是由强变弱;在3个月,6个月及12个月时,治疗组CyclinE的表达低于对照组(P<0.05);24个月时,治疗组和对照组表达无差异(P>0.05)。各组内部,3个月比6个月表达量高(P<0.05);3个月和6个月分别与12个月,24个月及正常皮肤比较表达明显增高(P<0.05);12个月,24个月与正常皮肤比较无差异(P>0.05)。(3)PCNA检测结果:对照组和治疗组的PCNA表达都随着时间的发展由强变弱。在各组内部,4个时间点PCNA表达各有差异,有统计学意义(P<0.05)。且治疗组和对照组分别在3个月,6个月和12个月时表达各有差异(P<0.05),24个月时表达无差异(P>0.05)。(4)凋亡细胞检测:对照组和治疗组的凋亡细胞的表达则随着时间的发展由弱变强。在对照组和治疗组组内,4个时间点凋亡细胞表达各有差异,且有统计学意义(P<0.05)。对照组和治疗组分别在6个月、12个月和24个月时,凋亡细胞表达有差异(P<0.05);在3个月时表达无差异(P>0.05)。(5)胶原纤维检测:随着压力的作用,呈漩涡状的胶原纤维束变直,开始排列疏松有序。结论:1, P57kip2, CyclinE在增生性瘢痕中异常表达与增生的发生,发展密切相关。2,通过对P57kip2和CyclinE的检测显示,压力能加速增生性瘢痕的演变进展。3,治疗组的PCNA和细胞凋亡的检测显示,压力能加速皮肤成纤维细胞的凋亡和抑制其增殖,从而抑制瘢痕增生。4,压力能加速胶原纤维的演变进展,使得呈漩涡状的胶原纤维束变直,排列疏松有序。
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