【摘 要】
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目的慢性淋巴细胞性甲状腺炎（CLT）是20-40岁的青年女性中最常见的自身免疫性疾病。CLT的特征是血清中一种或几种甲状腺自身抗体滴度升高,主要有甲状腺球蛋白抗体（Tg Ab）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）,无论是否存在（亚）临床甲状腺功能状态异常。很多研究证实CLT与女性生殖功能及不良妊娠结局显著相关。近年来,也有部分研究探索了CLT对子代发育的影响,但尚无统一结论。因此,本研究主要通过建
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目的慢性淋巴细胞性甲状腺炎（CLT）是20-40岁的青年女性中最常见的自身免疫性疾病。CLT的特征是血清中一种或几种甲状腺自身抗体滴度升高,主要有甲状腺球蛋白抗体（Tg Ab）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）,无论是否存在（亚）临床甲状腺功能状态异常。很多研究证实CLT与女性生殖功能及不良妊娠结局显著相关。近年来,也有部分研究探索了CLT对子代发育的影响,但尚无统一结论。因此,本研究主要通过建立实验性CLT雌性大鼠模型,探索孕前CLT对子代认知功能及海马神经元发育的影响,以明确孕前筛查甲状腺自身抗体的必要性。研究对象与方法选用20只SD雌性大鼠进行七天适应性喂养后,随机平均分入慢性淋巴细胞性甲状腺炎组（CLT组）和对照组（CON组）。CLT组SD雌性大鼠通过在尾根部皮下多点注射猪甲状腺球蛋白构建CLT疾病模型。造模成功后,分别测定2组雌鼠Tg Ab和TPOAb水平。各组雌雄大鼠随机按3:1的比例交配合笼,以观察到雌鼠阴道口形成阴栓确定妊娠。剔除实验过程中死亡、感染、未成功受孕以及未成功自然分娩的SD雌性大鼠,最后SD雌性大鼠计入统计结果及进行其子代大鼠相关实验的共16只,每组各8只。仔鼠出生后第30天,每组随机各选取8只仔鼠进行实验。仔鼠行为学测试通过Morris水迷宫进行。实验结束后采集仔鼠大脑组织,制备海马标本,并进行苏木素伊红染色、尼氏染色及免疫组化染色,观察各组海马神经元形态及神经元特异核蛋白（Neu N）和突触相关蛋白（SYN）的表达情况。SPSS 23.0统计学分析数据,P＜0.05有统计学差异。结果（1）各组孕鼠血清甲状腺自身抗体滴度:CLT组的Tg Ab（113.40±43.72）U/ml、TPOAb（79.09±25.43）U/ml,较CON组的Tg Ab（15.59±1.66）U/ml、TPOAb（33.33±4.85）U/ml均显著升高（P＜0.05）。（2）Morris水迷宫实验:为期5天的定位航行测试中,各组仔鼠到达平台的逃避潜伏期逐日减小,且在第1天时两组比较未见显著差异。结果显示,CLT组仔鼠第5天到达平台的潜伏期（42.94±11.40 s）与CON组（28.82±10.88 s）相比显著延迟（P＜0.05）。空间探索测试中CLT组仔鼠在原平台象限的滞留时间（16.71±8.10 s）较CON组仔鼠（28.30±9.08 s）明显缩短（P＜0.05）;CLT组仔鼠穿越平台次数（1.00±0.76次）较CON组（2.50±1.41次）显著减少（P＜0.05）。（3）海马苏木素伊红染色:各组均可观察到海马CA1区域神经元规则,排列有序,细胞膜完整,细胞核位于细胞中心,细胞内结构分明,无明显水肿。（4）海马尼氏染色:各组均可观察到海马组织CA1区神经元细胞质中被Nissl染色剂染色的许多蓝色大颗粒,细胞核大而圆,细胞质内有丰富的尼氏小体,锥体层细胞排列较整齐,呈锥体或球形,胞浆呈深蓝色。（5）海马组织Neu N表达水平:与CON组（1.15±0.38）相比,CLT组仔鼠海马组织CA1区Neu N阳性细胞的平均光密度（0.84±0.24）显著降低（P＜0.05）。（6）海马组织SYN表达水平:与CON组（0.49±0.03）相比,CLT组仔鼠海马组织CA1区SYN阳性细胞的平均光密度（0.34±0.05）显著降低（P＜0.05）。结论孕前患CLT的母鼠其仔鼠学习记忆功能下降,且孕前CLT可能通过损伤仔鼠海马神经元发育影响仔鼠认知功能。因此,应重视育龄期妇女孕前甲状腺自身抗体水平的筛查,利于提高出生人口素质。
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