本文研究了甘油培养基中有机氮源与溶氧水平对大肠杆菌表达外源蛋白(嘌呤核苷磷酸化酶)的影响,有机氮源对以甘油为碳源大肠杆菌菌体生长的影响及其机理的研究。在5 L发酵罐水平,培养基组分中的蛋白胨对大肠杆菌外源蛋白表达有十分重要的作用,在选取的五种蛋白胨中,蛋白胨Ⅰ最有利于大肠杆菌表达外源蛋白嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase),与其它四种相比,无论是蛋白含量还是酶活均为最高,外源蛋白占总蛋白的含量、外源蛋白酶酶活和外源蛋白比酶活分别达到41.9%,440 U和3.8 U/mg。同时,控制适当水平的溶氧(10-30%),有助于外源蛋白的表达,外源蛋白占总蛋白的含量、外源蛋白酶酶活和外源蛋白比酶活均为最高,10-30%的溶氧水平既满足菌体正常生长对氧气的需求,又避免游离氧对已表达出的外源蛋白产生结构性破坏,能够较好地保护外源蛋白的活性。此外在甘油培养基中有机氮源也对大肠杆菌菌体的生长有影响,在摇瓶培养水平,甘油基本培养基中添加一定量的氨基酸能促进大肠杆菌生长,在选取的12种氨基酸中,添加Ser和Arg促进生长效果最好,5.5 h时在基本培养基中添加0.35 mMSer和Arg,菌体浓度分别增加了63%和53%。实验证明,氨基酸对大肠杆菌生长的促进作用并不是以碳源或氮源形式起作用的,而是通过加快甘油比消耗速率实现的,并且这种促进生长作用可能只存在于非磷酸烯醇式丙酮酸碳水化合物磷酸转移酶系统(non-PTS)的糖类。