马尾松花粉多糖及其酯化物结构解析

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松花粉是我国传统药食兼用的花粉品种,具有改善心脑血管功能、抗疲劳、抗氧化、护肝等功效,在国内外被广泛的应用于保健品、药品、饲料添加剂等领域[1]。马尾松花粉中含有蛋白质、碳水化合物、脂类、维生素、微量元素、酶、核酸等。本文以马尾松花粉为原料,从马尾松花粉中提取多糖并分离纯化,纯化后的多糖进行硫酸酯化修饰,根据化学方法和仪器方法对其进行结构解析,得到如下结论:1.马尾松花粉多糖的提取,分离及纯化用超声提取与热水浸提相结合的方法从马尾松花粉中提取多糖,经SephacrylS-400HR层析进行多次分离纯化后得到单一组分MPP60-B-Ⅱ。2.马尾松花粉多糖的硫酸酯化修饰采用氯磺酸-吡啶法对MPP60-B-Ⅱ进行硫酸酯化修饰,得到硫酸酯化多糖:MPPS60-B-Ⅱ。用BaSO4比浊法检测MPPS60-B-Ⅱ硫酸根含量,取代度为1.44。3.马尾松花粉多糖的单糖组成MPP60-B-Ⅱ经水解后进行衍生化,用GC色谱分析其中性糖的单糖组成发现:主要由鼠李糖,阿拉伯糖,岩藻糖,葡萄糖,半乳糖组成,其摩尔比为1.72:5.2:6.66:1:1.16;且经苯酚-硫酸法检测,多糖中中性糖含量为75.34%;改良的咔唑法检测多糖中糖醛酸的含量为41.68%。4.马尾松花粉多糖的理化性质及化学结构用不同分子量的葡聚糖做标准品,测得MPP60-B-Ⅱ,MPPS60-B-Ⅱ的分子量分别为2.08×10~5Da,1.15×10~5Da。经紫外全波长扫描,MPP60-B-Ⅱ,MPPS60-B-Ⅱ在260nm,280nm都无吸收峰,说明两者都不含蛋白质和核酸。红外光谱中显示MPP60-B-Ⅱ具有多糖的特征吸收峰,且为酸性多糖,多糖中含即含有α构型,也含有β构型。MPPS60-B-Ⅱ除多糖的特征吸收峰外,含有硫酸酯键的特征吸收峰,说明被成功硫酸酯化。高碘酸氧化-Smith降解结果显示MPP60-B-Ⅱ主要含有1→6键型。通过NMR判断出此多糖中既含有α与β两种构型,且为酸性多糖。因MPP60-B-Ⅱ分子量较大,13C NMR实验累加时间不够,阻碍了对NMR的进一步解析。
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