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目前鉴定出的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)型别已超过了150种,其具有不同的组织嗜异性。嗜黏膜组HPV依照其诱发病变的良恶性又可分为高危型和低危型。持续性高危型HPV感染是宫颈癌发生的主要病因,目前已经发现15种高危型HPV,如HPV16、-18、-45、-58、-52、-31、-33等；低危型HPV主要诱发生殖器疣等良性病变,其中HPV6和-11的感染与90%的尖锐湿疣有关。嗜皮肤组HPV主要诱发皮肤疣等良性病变,如HPV5与疣状表皮发育不良有关。上市的以HPV主要衣壳蛋白Ll为基础的病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)疫苗诱发型别限制性的中和抗体,主要预防HPV16和-18两种高危型病毒感染相关的约70%的宫颈癌。次要衣壳蛋白L2N端区域含有多个保守中和表位,其中HPV16L2氨基酸(amino acid, aa.)17-36为主要中和表位,可诱发产生低水平的交叉中和抗体及保护反应,是目前广谱HPV L2预防性疫苗的研究热点。FcyR-免疫复合物可介导抗原捕获、内吞及加工呈递,同时诱导DC成熟,进而促进B细胞、Th细胞活化及特异性免疫反应。鉴于蛋白疫苗的安全性好,具有诱发抗体反应的优势,本研究选择改造IgG1Fc段(含4个拷贝FcγR结合位点,简称R4)作为HPV16L2aa.17-36多表位的载体,进行了L2多肽及R4融合蛋白(简称L2R4)疫苗的研究。结果表明,本研究构建的两种L2R4融合蛋白E3R4(含3个L2表位)和E12R4(含12个L2表位)均可在昆虫细胞中高水平分泌表达,每100ml上清中E3R4和E12R4融合蛋白的表达量分别为3mg和2.5mg。一步rProtein A亲和层析法纯化获得的L2R4融合蛋白纯度较高,其中E3R4的稳定性较好,E12R4部分降解。ELISA检测发现两种融合蛋白均可与针对HPV16L2aa.17-36表位的单克隆抗体RG-1高水平结合。协同完全弗氏佐剂／不完全弗氏佐剂皮下免疫BALB/c小鼠,ELISA法分析血清抗体水平。结果表明,E3R4及E12R4免疫组诱发产生的针对HPV16、-18、-45、-52、-58、-6、-11及-5假病毒(pseudovirus, PsV)的抗体水平均显著性高于E3多肽免疫组及R4载体免疫组；另外,E3R4诱发的抗体水平显著性的高于E12R4。本研究表明,改造IgG1Fc作为载体可以提高融合抗原的免疫原性,利用昆虫细胞生产的E3R4疫苗可诱发产生高水平的针对多种HPV型别的结合抗体。E3R4疫苗生产体系具有表达水平高,易于纯化的特点,本研究为广谱HPV L2预防性疫苗的研究奠定了基础。