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鼠伤寒沙门氏菌rfbN基因编码的蛋白为合成0-抗原的鼠李糖转移酶,它负责转运鼠李糖。我们构建了鼠伤寒沙门氏菌rfbN基因缺失株以及阿拉伯糖调控rfbN基因表达的突变株,并对其进行生物学特性的初步研究,主要内容可归纳如下：1鼠伤寒沙门氏菌rfbN基因缺失株的构建鼠伤寒沙门氏菌rfbN基因大小945bp,我们构建了重组自杀性质粒pYA4286-ΔrfbN,利用自杀性质粒介导的同源重组方法,构建了rfbN基因缺失株。LPS图谱显示,ArfbN缺失株没有完整的LPS,其LPS结构包括类脂A、核心多糖和一个半乳糖。我们构建了15a-rfbN回补质粒,将其电转化入ΔrfbN缺失株,LPS图谱显示,15a-rfbN回补质粒能够恢复ΔrfbN缺失株的LPS结构,表明成功构建rfbN基因缺失株。2鼠伤寒沙门氏菌阿拉伯糖调控rfbN基因突变株的构建我们通过改造rfbN基因的SD序列和起始密码子,构建了重组自杀性质粒pYA4286-ApagL-TT araC PBADrfbN,利用自杀性质粒介导的同源重组方法,构建了两株阿拉伯糖调控rfbN基因表达的突变株:ΔrfbNΔpagL::TT araC PBADrfbN(起始密码子ATG)和ΔrfbNΔpagL::TT araC PBADrfbN(起始密码子GTG)。在有阿拉伯糖存在条件下,ArfbNApagL::TT araC PBADrfbN(起始密码子ATG)突变株,调控表达rfbN基因,使细菌能够合成完整的LPS；而没有阿拉伯糖的条件下,rfbN基因不表达,其LPS表型与ΔrfbN株相同。然而,在有阿拉伯糖存在条件下,ΔrfbNΔpagL:;TT araC PBADrfbN(起始密码子GTG)突变株,rfbN基因少量表达,细菌没有完全恢复LPS结构。3鼠伤寒沙门氏菌突变株生物学特性研究为了解析rfbN基因对鼠伤寒沙门氏菌生物学特性的影响,我们系统地比较了突变株与野生株在生长曲线、泳动与群集、对多粘菌素B的抵抗力、粘附与入侵及毒力这几个方面的差异。结果表明,ArfbN缺失株与ΔrfbNApagL::TT araC PBADrfbN(起始密码子ATG)突变株在体外生长曲线、细胞粘附率、细胞入侵率与野生株无显著性差异。相比之下,rfbN基因缺失后,菌株的泳动和群集能力显著下降(P<0.001),在多粘菌素B作用下的存活率显著下降(P<0.001),毒力下降。同时,在阿拉伯糖存在条件下,△rfbNΔpagL:TT araC PBADrfbN(起始密码子ATG)突变株的泳动和群集能力得到提升,而完全恢复对多粘菌素B的抵抗力。综上所述,我们证实,rfbN基因的缺失对鼠伤寒沙门氏菌的体外繁殖、粘附与入侵没有影响,却能显著降低细菌的毒力和对生物活性物质的抵抗力。