【摘 要】
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本研究以“丰香”和“全明星”2个草莓品种为试材,研究了草莓基因型、激素配比、基本培养基、pH值、外植体、叶片放置方式对草莓不定芽再生的影响,优化了草莓再生条件,获得了“
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本研究以“丰香”和“全明星”2个草莓品种为试材,研究了草莓基因型、激素配比、基本培养基、pH值、外植体、叶片放置方式对草莓不定芽再生的影响,优化了草莓再生条件,获得了“全明星”草莓叶片高效再生体系。通过叶片与农杆菌共培养的方法,将抗真菌chi5B基因导入草莓叶片,并获得了抗卡那霉素的抗性植株,建立了“全明星”草莓的遗传转化体系。 叶片再生试验结果表明,草莓基因型不同,其再生能力也不同。“全明星”草莓的再生率明显高于“丰香”。培养基组成和激素配比直接影响草莓再生,MS培养基与MS(无机成份)+B5(有机成份)相比,可得到较高的不定芽再生率,但差异不显著。pH值、外植体、叶片放置方式也影响“全明星”草莓叶片的再生率,最佳pH值为5.8。用“全明星”草莓叶片和叶柄进行不定芽再生试验,发现叶片再生率明显高于叶柄,叶片背面接触培养基有利于叶片再生。“全明星”草莓不定芽分化最适宜的培养基条件为MS+BA2.0mg/l+NAA0.2mg/l,蔗糖3%,琼脂10%,pH值5.8,再生率为64%。 在建立“全明星”叶片不定芽再生体系的基础上,利用农杆菌介导的遗传转化法进行了“全明星”草莓的遗传转化研究。对转化过程中的一些因素进行了探讨。结果表明:“全明星”叶片和不定芽对卡那霉素的敏感试验,得出最适筛选浓度为30mg/l;对羧苄青霉素的抑菌试验,最适抑菌浓度为450mg/l;AS的加入可提高GUS的瞬时表达率;10-15分钟是最适合叶片侵染的时间;共培养3天对叶片转化比较合理。在上述适宜的转化条件下,农杆菌介导的“全明星”叶片的转化获得了抗性再生幼芽,再生率为1.1%。
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