CPPU对日本小果树HASKAOP组织培养的影响及超低温保存

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ayun2009
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日本北海道特产高营养小果树HASKAOP(Lonicera caerulea L.var.emphyllacalyx Nakai)原产于日本北海道,是一种营养非常丰富的野生果树,具有极高的经济价值和药用价值。为了成功保存北海道特产小果树HASKAOP种质资源,本试验将近年来新发现的一种细胞分裂素CPPU应用于小果树的组织培养中,探索其促进小果树扩繁的最佳使用浓度,并用超低温的方法保存种质资源,以期为小果树种质资源的离体保存提供理论依据。主要研究结果如下:1.为了探索CPPU在北海道特产小果树HASKAOP组织培养中的应用效果,就CPPU单独使用及其与6-BA组合后对小果树节间不定芽的分化诱导效果进行了试验.结果表明:单独添加CPPU的最佳诱导浓度为0.2mg/L,6-BA 0.5mg/L和CPPU 0.5 mg/L配比组合是北海道特产小果树HASKAOP节间分化不定芽的最佳组合,并且CPPU的作用强于6-BA。2.建立了小果树节间玻璃化法超低温保存体系。其保存方法为:0.5~0.7cm的节间,在含有0.7mol/L蔗糖的培养基上预培养2d,然后剥取2.5~3.5mm的节间,先在室温下用60%PVS2溶液预处理20~30min,再用100%PVS2溶液于0℃下处理60min,换一次PVS2溶液后迅速投入液氮。24h后取出,在37℃~40℃水浴中化冻2min,用1.2mol/L的蔗糖培养液洗涤2次,每次10min,然后转入1/2 MS+6-BA 0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA 0.3mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L恢复培养基上,暗培养1周后转移到正常光下,最高可获得80.00%的成活率和51.11%的再生率。3.对超低温保存后节间的恢复培养基进行了筛选。超低温保存后的小果树节间在1/2 MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+GA 0.3mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L的培养基上恢复生长最好,节间成活率和再生率最高,分别为73.33%和51.11%。
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