目的观察大黄及总蒽醌对大鼠肾脏的损害作用与可逆性,确定总蒽醌是否为大黄的主要毒效部位,以指导安全用药。方法8周龄SD大鼠90只,随机分为正常对照组(NC组),2g/kg大黄组、73mg/kg总蒽醌组,每组30只。连续灌胃60天,观察大鼠的一般状态、末次给药后24h、停药30天、60天,各组分别处死1/3大鼠,取其双侧肾脏称重,计算肾脏脏器指数;通过HE染色法,对大鼠肾脏组织进行病理学检查;生化法检测大鼠血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、β2微球蛋白(β2-MG),尿液中β2微球蛋白(β2-MG)的含量变化;免疫组织化学方法检测大鼠肾脏组织中Bcl-2、Bax蛋白表达水平,Western Blot法检测大鼠肾脏Bcl-2、Bax蛋白的水平;RT-PCR法检测肾脏Bcl-2、Bax m RNA的表达水平。结果1一般状态:给药第1天各给药组大鼠排稀便、软便,粪便颜色呈深褐色;蒽醌组大鼠尿液呈棕红色。大黄组为浅红色,第5天变为深红色。蒽醌组给药第15天、大黄组给药第30天大鼠可见皮毛的洁度较差,活动减少,精神不佳,总蒽醌组还可见大鼠背毛红染。至给药第60天大黄与总蒽醌组均出现皮毛清洁度差,活动少,大便稍成形。大黄组各项状态略好于总蒽醌组且未见背毛红染。大黄组停药第10天、蒽醌组停药第30天上述症状得到改善,皮毛光洁度改善,活动量增加,进食量增加。停药60天各组与NC组比较未见差异。2对大鼠体重的影响:1)雄性大鼠:大黄组给药42天至停药28天与NC组比较体重明显减轻,有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。蒽醌组给药35天至停药28天与NC组比较体重明显减轻,有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。各给药组大鼠停药37天至停药60天体重与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2)雌性大鼠:大黄组给药28天至停药35天与NC组比较体重明显减轻有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。总蒽醌组给药21天至停药35天与NC组比较体重明显减轻,有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。各给药组大鼠停药42天至停药60天(体重与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。3对大鼠肾脏指数的影响:大黄与总蒽醌给药60天组肾脏指数均明显高于NC组(P<0.05或P<0.01),停药30天、60天差异无统计学意义(P>0.05);4对大鼠血清:SCr、BUN、β2-MG。尿液:β2-MG含量的影响:给药60天,大黄组和总蒽醌组BUN含量显著高于NC组(P<0.01):SCr和β2-MG含量与正常对着组比较差异无统计学意义。停药30、60天BUN、SCr、β2-MG含量与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。给药60天大黄组和总蒽醌组尿液中β2-MG含量显著高于正常NC组(P<0.05)。停药30、60天β2-MG含量与正常NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)5对大鼠肾脏组织结构的影响:给药60天:大黄组和总蒽醌组与NC组比较肾脏近曲小管上皮细胞出现水肿变性,部分肾小管管腔狭窄,肾小管上皮细胞脱落出现细胞空洞、坏死等病理改变。总蒽醌组肾小管上皮细胞出现未知深棕色颗粒,且深棕色颗粒随病变程度增多;停药30天:大黄组与NC组比较肾脏未见明显病理改变;总蒽醌组上述病理损害减轻,但仍可见深棕色颗粒沉积。停药60天:大黄组和总蒽醌组与NC组比较肾脏未见病理改变,但总蒽醌组肾小管上皮细胞中仍然可见深棕色颗粒。6对大鼠肾脏组织中Bcl-2、Bax蛋白及m RNA表达的影响:给药60天大黄组与总蒽醌组大鼠肾脏Bcl-2蛋白及m RNA表达水平均显著低于NC组(P<0.05);停药30天、60天大黄组与总蒽醌组Bcl-2蛋白及m RNA表达水平与NC组差异无统计学意义(P>0.05)。给药60天总蒽醌组Bax蛋白及m RNA表达水平显著高于NC组(P<0.05);给药60天大黄组Bax蛋白及m RNA表达水平与NC组差异无统计学意义(P>0.05),停药30天、60天大黄组和总蒽醌组Bax蛋白及m RNA表达水平与正常NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。给药60天大黄组与总蒽醌组Bcl-2/Bax蛋白及m RNA的比值均低于NC组(P<0.01)。停药30天、60天大黄组与总蒽醌组Bcl-2/Bax蛋白及m RNA的比值与NC组比较差异无统计学意义(P<0.05)。结论连续长期应用大黄或大黄总蒽醌会对大鼠的肾脏功能及其结构有一定的损害作用,此种损害是可逆的。推测大黄总蒽醌可能为大黄的主要毒效部位。