【摘 要】
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大肠杆菌重组蛋白表达系统,如近年来的BL2l(DE3)(pET)系列,是制备许多重组功能蛋白的首要选择.对大肠杆菌中表达重组蛋白的策略进行优化,不但有应用上的意义,也能为以大肠杆
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大肠杆菌重组蛋白表达系统,如近年来的BL2l(DE3)(pET)系列,是制备许多重组功能蛋白的首要选择.对大肠杆菌中表达重组蛋白的策略进行优化,不但有应用上的意义,也能为以大肠杆菌为模型进行细胞代谢、基因调控、蛋白折叠和转运等方面的研究提供新的素材,因此具有重大的意义.该文以大肠杆菌BL21(DE3)(pET)、DH5 α(pGEX)和TGl(pBV220)系统为对象,研究了十数种异源于大肠杆菌的基因在这些系统中.各种培养条件下进行胞内表达的情况,提出了与常规对数期表达策略截然不同的静止期表达策略.用该种改进策略对目的基因进行诱导表达,不但能获得产量更高更稳定的目的重组蛋白,而且提高了表达质粒的稳定性,还能减少抗生素的使用并提高菌体对培养基中营养物质的利用率.对大肠杆菌系统在工业或制药规模上制备重组蛋白的工艺的摸索有较大的参考价值.蛋白质的跨膜转运作为一种基本的细胞生理活动,是近年来分子生物学研究的热点和难点,更有其应用上的重要意义.一般认为大肠杆菌对蛋白转运的效率不高,而且蛋白一般被转运至细胞内外膜之间的周质空间(periplasm).另一方面,人类胰腺分泌胰蛋白酶抑制剂(human pancreatic secretory trypsin inhibitor,PSTI)由56个氨基酸构成,具有治疗胰腺炎等功效,过往有研究报道在大肠杆菌中分泌表达,切割信号肽后的成熟蛋白能直接透过大肠杆菌的外膜分泌到培养基上清中,有利于纯化和活性检测.然而重组PSTI无论是在大肠杆菌还是在酵母、肿瘤细胞等表达系统中的得率都比较低.因此,以PSTI为模型研究其在大肠杆菌和酵母中的跨膜转运有其深远的理论研究及实际应用价值.该论文介绍了基于大肠杆菌BL21(DE3)(pET22b)的PSTI表达系统的构建和目的蛋白分泌表达的研究,并在培养物上清中获得了活性成分.该论文介绍了基于pET22b载体构建的7种融合了不同信号肽和PSTI基因的表达载体,该系列载体的信号肽基因同时具备被负责蛋白跨膜转运的Sec系统和Tat系统辨别的特征,为将来可能进行的大肠杆菌Sec系统和Tat系统转运蛋白的研究打下了基础.
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摘 要： 合作学习一般是指学生在老师的指导下，以小组为单位，通过组内自主探索和互助学习，最终完成学习任务的一种开放的学习方式。高中物理是一门非常重要的基础课程，也是学生普遍反应相对较难的一门课程，因此将合作学习这种方式应用到高中物理的教学实践中具有重要的意义。 关键词： 合作学习 高中物理教学 实践研究 一、合作学习的重要性和可行性 现代素质教育的理念是以学生为中心，把提高学生的综合能力作为
AZO薄膜作为一种新兴的半导体材料,一经问世便引起了科学家们的普遍关注。目前,AZO薄膜的研究重点主要集中在其透明导电方向上,国内外科研人员针对AZO透明导电薄膜的光电性能、晶体结构、镀膜技术及其相关器件的开发应用已进行了深入研究。随着薄膜研究的不断进展,发现由导体的ZnO和绝缘的Al_2O_3复合而成的AZO薄膜材料具有宽范围的电阻可调性,能够满足微通道板导电层的电阻率要求。不同于传统AZO透明
摘 要： 初中阶段，就物理学习而言，对学生是关键时期。教师要上好序言课，重视实验教学，充分利用多媒体，与学生加强情感交流，让学生体验成功，培养学生的学习兴趣。 关键词： 初中物理教学 学习兴趣 实验教学 多媒体教学 情感交流 初中阶段，就物理学习而言，对学生是关键时期。作为教师，我们要引导学生自己打开盒子，了解物理最有趣的地方，这对学生初中学习，甚至以后的学习都具有深远的影响。 一、上好序言
爱因斯坦说：“兴趣是最好的老师。”这就是说一个人一旦对某事物有浓厚的兴趣，就会主动求知、探索、实践，并在求知、探索、实践中产生愉快的情绪和体验。兴趣是引导学生独立学习的重要源泉和动力之一，它能激发和引导人的思想和意志，并努力探讨事物的奥秘，促进其智力的开发和学习效率的提高。学生有了兴趣，才会有求知的欲望，才会积极思维努力探索。但要让学生对历史这门课感兴趣，就必须让他们充分认识到学习历史的重要性和找
土壤中的反硝化过程主要由微生物参与，过去的很长一段时间以来，人们一直把土壤中的反硝化作用归结于反硝化细菌的作用，忽视了土壤中其它微生物的作用。而很多文献资料表明，反硝化
我从事高中物理教学多年，积累了一些经验，现就我的看法和体会与同仁们一起探讨： 1.关注学生必备的物理素质的培养 培养学生必备的物理素质，不但要向学生传授基本事实、概念、原理等知识，而且要使学生具备物理能力，培养学生的物理科学观。因此，在教学过程中，首先要避免向学生传输说教式的、纯理论性的知识，让学生感受到学的是“对生活有用的物理”、“对终身发展有用的物理”，使学生由被动学习转变为主动学习。引导
摘 要： 科学探究的核心在于强调学生的能力培养和突出“做”的过程，彰显学生的主体作用。通过科学探究的方式，学生可以从物理现象入手学习物理知识，应用所学物理知识解决实际问题。在初中物理教学中，教师应积极开展探究性学习活动，加强学生探究能力的培养。 关键词： 初中物理教学 探究学习 学习行为 实验教学 美国某科技馆的墙壁上写着这样的话：“我听过了，就忘记了；我看过了，就知道了；我做过了，就记住了！
本文提出了一种新型的光纤布拉格光栅传感器。以光纤布拉格光栅作为敏感元件,当光纤光栅受到的压力和温度变化时,中心波长会发生偏移,中心波长偏移量的大小与所施加的压力和