SMUG1和5-FU对小鼠卵子和植入前胚胎发育作用的研究

来源 :内蒙古大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wenlimm
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SMUG1(Single-strand-selective monofunctional uracil DNA glycosylase 1)是单链选择性单功能尿嘧啶DNA糖基化酶1,能够引发碱基切除修复(Base Excision Repair,BER)途径,切除掺入到DNA中的尿嘧啶、5-羟甲基尿嘧啶(5-hydroxymethyluracil,5-hmU)和5-氟尿嘧啶(5-fluoropyrimidines,5-FU)。5-FU是一种抗代谢药物,被广泛使用于肿瘤的化学治疗。在第一部分的实验研究中,我们首先利用免疫荧光染色法检测了SMUG1在卵母细胞和早期胚胎中的定位。接着通过SMUG1-Morpholino特异性地敲低了SMUG1,并探讨了其在卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中所起的作用。最后检测了SMUG1对合子DNA去甲基化进程的影响。结果表明,SMUG1在卵母细胞和早期胚胎的各阶段均有表达,且主要定位在细胞核中。SMUG1的敲低不会对卵母细胞的成熟进程产生影响,但会显著抑制早期胚胎的发育。此外,在1-细胞胚胎中敲低SMUG1不会影响DNA去甲基化进程。在第二部分的实验研究中,我们探讨了5-FU对小鼠卵母细胞、早期胚胎和卵巢的影响。在含有50μM、100μM和500μM 5-FU的培养液中培养GV期卵母细胞和早期胚胎。发现5-FU不会影响GVBD进程,但是在含500μM的培养液中GV卵的成熟率显著降低。5-FU还会抑制胚胎发育,阻碍囊胚形成。腹腔注射5-FU的小鼠,超数排卵后不能成功排出卵子,其卵巢体积明显缩小,卵巢中黄体数目减少,且无成熟卵泡形成。综上所述,SMUG1对小鼠早期胚胎发育过程具有重要的调控作用,但对受精卵中雄原核的DNA去甲基化进程没有显著作用。5-FU能够对小鼠卵母细胞和早期胚胎造成毒性,还会对卵巢的功能产生影响。
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