论文部分内容阅读
目的：烧伤后容易发生以“高糖血症”为表现的糖代谢障碍,容易引起不良预后。研究表明,烧伤后糖代谢障碍与胰腺损伤密切相关。Exendin-4是一种GLP-1受体激动剂,并具有高糖依赖的胰岛素促泌作用,且不会导致低血糖。近年来研究报道Exendin-4能抑制氧化应激、炎症和凋亡,而目前Exendin-4保护严重烧伤后胰腺损伤的机制尚缺乏研究。因此,本研究拟探讨Exendin-4对严重烫伤大鼠早期胰腺损伤的影响与机制。方法：成年健康Wistar大鼠96只,随机分为假烫组、假烫给药组、烫伤组和烫伤给药组,每组24只。烫伤组和烫伤给药组大鼠背部浸于94。C热水12秒,腹部6秒,制备50%TBSAⅢ°烫伤模型,假烫组和假烫给药组使用37℃温水,其余处理相同。烫伤给药组和假烫给药组伤后立即于皮下注射Exendin-4 (4ug/kg),并于伤后每天8：00和20：00分别给药一次,其它组大鼠同时以相同方式给予相同剂量的灭菌注射用水。伤后1d、3d和5d,剪尾法采血检测各组大鼠空腹血糖浓度；放射免疫法检测血清胰岛素浓度；干湿质量法计算胰腺组织含水量；HE染色观察胰腺形态变化；硫代巴比妥酸法检测胰腺组织丙二醛(MDA)含量；免疫组织化学法分析胰腺诱导性一氧化氮合酶(iNOS)表达水平；免疫印迹法分析胰腺组织3-硝基硝基络氨酸(3-NT)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)蛋白、活化部分半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)表达水平。结果：假烫组和假烫给药组大鼠伤后各时相点空腹血糖浓度均无明显升高或降低；烫伤组大鼠伤后1d、3d和5d空腹血糖浓度显著高于假烫组和假烫给药组；烫伤给药组大鼠伤后1d和3d空腹血糖浓度显著低于烫伤组；烫伤给药组大鼠伤后1d空腹血糖浓度显著高于假烫组和假烫给药组。假烫组和假烫给药组大鼠各时相点空腹血清胰岛素浓度均无明显升高或降低；烫伤组大鼠伤后各时相点空腹血清胰岛素浓度均显著高于假烫组和假烫给药组；烫伤给药组大鼠伤后各时相点空腹血清胰岛素浓度均显著高于烫伤组。假烫组和假烫给药组大鼠伤后各时相点胰腺组织含水量均无明显升高或降低；烫伤组和烫伤给药组大鼠伤后1d胰腺组织含水量显著高于假烫组和假烫给药组；与烫伤组比较,烫伤给药组大鼠胰腺组织含水量无明显升高或降低。HE染色结果显示,假烫组和假烫给药组大鼠伤后各时相点胰岛形态规则,β细胞数量丰富,分布均匀,排列紧密,胞浆浓染,偶见空泡样改变；烫伤组大鼠伤后1d即出现胰岛空泡样变和p细胞数量减少,伤后3d胰岛内出现广泛空泡样变,p细胞数量显著减少,伤后5d胰岛空泡样变轻于伤后3d,β细胞数量多于伤后3d；烫伤给药组大鼠伤后各时相点胰岛空泡样变均轻于烫伤组,β细胞数量均多于烫伤组。假烫组和假烫给药组大鼠伤后各时相点胰腺组织丙二醛(MDA)含量均无明显升高或降低；烫伤组大鼠伤后各时相点胰腺组织丙二醛(MDA)含量均显著高于假烫组和假烫给药组；烫伤给药组大鼠伤后1d和3d胰腺组织丙二醛(MDA)含量均显著高于假烫组和假烫给药组；与烫伤组比较,烫伤给药组大鼠伤后5d胰腺组织丙二醛(MDA)含量低于烫伤组。免疫组化结果显示,假烫组和假烫给药组大鼠伤后各时相点胰岛诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平均无明显升高或降低；烫伤组大鼠伤后各时相点胰岛诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平均高于假烫组和假烫给药组；烫伤给药组大鼠伤后各时相点胰岛诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平均低于烫伤组,高于假烫组和假烫给药组。Western Blot结果显示,假烫组和假烫给药组大鼠伤后各时相点胰腺组织3-硝基酪氨酸(3-NT)蛋白水平表达水平均无明显升高或降低；伤后3d和5d,烫伤组大鼠胰腺组织3-NT蛋白表达水平显著高于假烫组和假烫给药组；伤后3d和5d,烫伤给药组大鼠胰腺组织3-NT蛋白表达水平显著低于烫伤组,显著高于假烫组和假烫给药组。Western Blot结果显示,假烫组和假烫给药组大鼠伤后各时相点胰腺组织Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达水平均无明显升高或降低；伤后3d和5d,烫伤组大鼠胰腺组织Bax蛋白表达水平显著高于假烫组和假烫给药组；伤后3d和5d,烫伤给药组大鼠胰腺组织Bax蛋白表达水平低于烫伤组,显著高于假烫组和假烫给药组。Western Blot结果显示,假烫组和假烫给药组大鼠伤后各时相点胰腺组织Cleaved caspase-3蛋白表达水平比值均无明显升高或降低；烫伤组大鼠伤后各时相点胰腺组织Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著高于假烫组和假烫给药组；烫伤给药组大鼠伤后各时相点胰腺组织Cleaved caspase-3蛋白表达水平低于烫伤组,高于假烫组和假烫给药组。结论：皮下注射Exendin-4可抑制胰腺脂质和蛋白质过氧化损伤,抑制胰腺过度炎症和凋亡级联反应,改善胰腺损伤程度,增加胰岛p细胞数量,促进严重烫伤大鼠伤后胰岛素分泌,降低空腹血糖浓度,但不会导致低血糖。