【摘 要】
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背景乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一[1]。目前,乳腺癌已经成为我国女性发病位居首位的恶性肿瘤[2]。微小核糖核酸(microRNA)是一种短小的内源性非编码单链RNA分子,主要参
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背景乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一[1]。目前,乳腺癌已经成为我国女性发病位居首位的恶性肿瘤[2]。微小核糖核酸(microRNA)是一种短小的内源性非编码单链RNA分子,主要参与基因表达的转录后调控[3,4]。microRNA在许多生物过程及病理过程中都发挥着十分重要的作用,并且经常在肿瘤细胞中出现异常表达的情况[5]。作为免疫检查点分子的抑制性免疫受体,程序性死亡-配体1(Programmed death-ligand 1,PD-L1,B7-H1,CD274)在不同类型的肿瘤中似乎都可以通过炎症细胞因子诱导生成,并且其过表达也被认为是肿瘤细胞从宿主免疫应答反应中逃逸的最主要机制[6,7]。国外研究表明PD-L1在正常乳腺组织中几乎不表达,主要表达于乳腺癌组织中[8]。然而,有关PD-L1在乳腺癌组织中表达与患者临床预后关系的研究却取得了不尽一致的结果,这可能与研究者采用不同的免疫组织化学方法(Immunohistochemistry,IHC)及购买不同品牌的抗体有关[9]。因为国内外大多数文献报道的都是使用免疫组织化学的方法研究PD-L1在乳腺癌组织中的表达情况,却鲜有检测人乳腺癌细胞中PD-L1表达情况,并且尚未有文献报道过microRNA-3609与PD-L1在人乳腺癌细胞中的表达关系。本研究着重检测和分析microRNA-3609和PD-L1在不同人乳腺癌细胞中的表达情况及两者之间的关系。目的检测microRNA-3609及PD-L1在不同人乳腺癌细胞中的表达情况,分析两者之间的表达关系,为后续研究microRNA-3609通过下调PD-L1表达对人乳腺癌细胞生长的影响和具体的作用机制做准备。方法1.采用Western Blot技术及实时荧光定量PCR技术检测PD-L1的蛋白及mRNA在正常人乳腺细胞HBL-100及四株不同人乳腺癌细胞MCF-7、MCF-7/ADR、MDA-MB-231、MDA-MB-468 中的表达情况。2.采用实时荧光定量PCR技术检测microRNA-3609的mRNA在上述五株细胞中的表达情况。结果1.与正常人乳腺细胞HBL-100相比较,PD-L1在MDA-MB-231、MDA-MB-468及MCF-7/ADR中均呈现较高水平的表达(P<0.05),在MDA-MB-231中表达最高(P<0.001)。2.与 HBL-100 相比较,microRNA-3609 在 MDA-MB-231、MDA-MB-468 及MCF-7/ADR中均呈现较低水平的表达(P<0.05),在MCF-7/ADR中表达最低(P<0.001)。结论1.与正常人乳腺细胞HBL-100相比,PD-L1主要表达于人乳腺癌细胞中。2.PD-L1和microRNA-3609在人乳腺癌细胞中的表达大致呈负相关关系。
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