金属氧化物富集卵黄高磷蛋白磷酸肽的研究

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蛋黄蛋白(EYP)是卵磷脂的加工副产物,也是一种优质的蛋白来源,可用于提取具有促进钙吸收功能的卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPPs)。本文分别研究了TiO2和ZrO2对EYP水解多肽中PPPs的富集效果,并对其中富集效果较好的材料进行改性研究,以提高材料的粒径和分离效率,进而简化PPPs的富集步骤,降低其富集成本。本研究不仅为EYP的综合利用提供新的研究方向,也为PPPs的富集提供新的方法。首先,以新鲜蛋黄粉为原料,通过脱脂、部分脱磷、酶解、冷冻干燥制得粗蛋黄蛋白水解多肽(粗多肽),用于提取PPPs。其中脱脂率约为95.47%,脱磷率为38.27%,胰蛋白酶酶解的水解度为11.51%。其次,分别以TiO2和ZrO2为介质,对粗多肽中的PPPs进行富集,TiO2在最适富集条件(初始粗多肽溶液的pH为4.0,浓度为30mg/mL,反应时间为20min,反应温度为25℃)下,富集得到的PPPs-T的N/P约为5.07,在其添加量超过200mg/L时,具有显著的阻止钙离子沉淀的作用,反应终点时的最大加碱量为1.64mL;ZrO2在最适富集条件(初始粗多肽溶液的pH为4.0,浓度为40mg/mL,反应时间为20min,反应温度为25℃)下,富集得到的PPPs-Z的N/P约为7.17,具有一定的持钙效果,但其持钙效果弱于TiO2,在添加量为400mg/L时,可将钙离子的沉淀过程推迟45min,反应终点时的最大加碱量为5.26mL。TiO2和ZrO2材料经10次重复使用,对PPPs的富集效果均保持稳定。再次,通过化学共沉淀法和煅烧法制备得到TiO2/硅藻土复合材料(TD),并对其进行性质表征。扫描电子显微镜(SEM)的结果表明TiO2成功沉积在多孔性硅藻土的表面;TD的粒径分布均匀,其中位粒径提高至22.89μm;TD的傅立叶转换红外光谱图(FTIR)中可以同时观察到TiO2和SiO2的特征吸收峰,以及Ti O Si的特征吸收峰,说明TD的合成中可能有化学键的参与;热重分析(TGA)结果显示TD经过煅烧后在高温下失重量较少,具有较好的热稳定性。最后,以TD为富集介质,对粗多肽中的PPPs进行富集,在最适富集条件(初始粗多肽溶液的pH为4.0,浓度为40mg/mL,反应时间为20min,反应温度为25℃)下,得到的PPPs-TD的N/P约为5.34,与PPPs-T相当,均明显低于ZrO2。TD的最大吸附载量(8.12mg/g)大于纯TiO2(4.64mg/g)。TD材料性质稳定,可实现重复利用,有助于降低富集成本。PPPs-TD具有显著的阻止钙离子沉淀的作用,在添加量为400mg/L时,反应终点时的最大加碱量约为1.32mL。本文的研究结果表明,ZrO2富集得到的PPPs纯度较低,具有一定的持钙性能,而TiO2及其改性材料TD富集得到的PPPs纯度较高,持钙性能较强,且TD材料性质稳定、分离方便、制备简单,具有大规模制备PPPs的巨大潜力。
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