目的： 制备抗小鼠B16黑色素瘤的抗独特型抗体（Ab2）并进行体外实验和鉴定，探讨通过免疫效应治疗或者预防小鼠B16黑色素瘤的可能性。 方法： 分别用gp75多肽和B16细胞作为抗原免疫BALB／c小鼠，通过杂交瘤技术制备抗gp75多肽的单克隆抗体（Ab1）和抗B16细胞的单克隆抗体（Ab1），用ELISA、Western Blot、免疫组织化学、免疫细胞化学、细胞免疫荧光染色等方法研究Ab1的特性。Ab1经胃蛋白酶水解制备F（ab’）₂片断，F（ab’）₂片断偶联载体蛋白KLH后作为抗原免疫BALB／c小鼠，用ELISA方法研究小鼠免疫血清中Ab2的特性。 结果： 获得6株能持续、稳定分泌抗gp75多肽单克隆抗体（Ab1）的杂交瘤细胞株，均为IgG1亚类，其中McAb D分泌稳定、特异性强、效价高；获得6株能持续、稳定分泌抗B16细胞单克隆抗体（Ab1）的杂交瘤细胞株，均为IgG2a亚类，其中McAb 4分泌稳定、特异性强、效价高。Western Blot结果显示McAb D识别约75KD的抗原，McAb 4识别约95 KD的抗原。免疫组织化学等结果表明McAb D和McAb 4所识别的抗原均定位于细胞膜和细胞浆。检测Ab1的F（ab’）₂片断免疫血清，结果血清中检测到Ab2和Ab3，Ab2与Ag竞争结合Ab1。 结论： Ab1对其抗原有特异亲和性，在小鼠体内能诱发独特型免疫网络级联反应，为进一步研究抗独特型抗体奠定了基础。