【摘 要】
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目的:各种原因导致的患者颌面部骨缺损是当前整形外科及口腔颌面外科的临床常见疾病。本实验基于骨组织工程的生物活性因子-种子细胞-支架材料的三要素,通过构建鼠脂肪干细胞（rat adipose-derived stem cells,rADSCs）来源的外泌体（exosomes,Exos）、rADSCs、纳米羟基磷灰石/I型胶原/聚乳酸-羟基乙酸共聚物[nano-hydroxypatite/collag
【基金项目】
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国家自然科学基金（No.51872332）； 国家重点研发计划（No.2019YFF0302403）；
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目的:各种原因导致的患者颌面部骨缺损是当前整形外科及口腔颌面外科的临床常见疾病。本实验基于骨组织工程的生物活性因子-种子细胞-支架材料的三要素,通过构建鼠脂肪干细胞（rat adipose-derived stem cells,rADSCs）来源的外泌体（exosomes,Exos）、rADSCs、纳米羟基磷灰石/I型胶原/聚乳酸-羟基乙酸共聚物[nano-hydroxypatite/collagen I/poly（lactic-co-glycolic acid）n HAC/PLGA]支架模型,将其植入大鼠颅骨缺损部位,验证exosomes及ADSCs联合支架材料的组织工程骨在体内促进骨缺损修复的优越性。研究方法:1.提取rADSCs并进行细胞的增殖、培养、成骨成脂诱导。2.提取成骨诱导的rADSCs衍生Exos,观察形态,并进行Exos内化rADSCs染色。3.制备n HAC/PLGA支架,检测支架生物细胞相容性及力学特性。设立对照组、单纯支架组、rADSCs+支架组、rADSCs+Exos+支架组,分别植入大鼠颅骨缺损中,术后4周、12周行Micro-CT扫描、HE染色观察各组成骨活性。结果:1.rADSCs在体外表现出良好的增殖分化能力,成骨诱导后茜素红染色可见大片钙结节形成,成脂诱导后油红O染色可见细胞内脂滴形成。2.利用超速离心法提取经成骨诱导的rADSCs来源的外泌体,荧光染色证明外泌体可被rADSCs摄取。3.体内实验可见rADSCs悬液+Exos支架组相较于其他各组在Micro-CT、HE染色表现出更好的成骨活性,且具有统计学意义。结论:Exos及rADSCs联合支架材料在大鼠颅骨缺损实验中表现出良好的成骨作用,有望成为临床中治疗骨缺损修复的新方法。
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