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目的:帕金森病轻度认知障碍(mild cognitive impairment in Parkinson’s disease,PDMCI)是帕金森病(Parkinson’s disease,PD)最为常见的非运动症状,其发生率高达18%-55%,然而PDMCI的病理机制尚不明确。我们前期的研究发现,微血管损伤和脑血流低灌共同参与PDMCI的发生和发展,但其具体分子调控机制不明。研究表明,轴突生长抑制因子(Nogo-A)作为负性调控因子参与中枢神经系统血管重塑。然而,目前未见Nogo-A参与调控PDMCI微血管损伤及重塑的研究报道。基于此,我们推测Nogo-A可能通过调控RhoA/ROCK信号通路参与PDMCI血管损伤及重塑。本研究旨在明确Nogo-A在PDMCI小鼠微血管损伤中的调控作用及机制,以期为PDMCI的防治提供可靠的证据支持。方法:给予C57BL/6J小鼠侧脑室注射相应的慢病毒包被转染体,以制备shRNA-Nogo-A模型小鼠;接着腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)和丙磺舒(Probenecid),以制备PD小鼠模型。随后进行Morris水迷宫测试(Morris Water Maze test),根据其认知功能进一步分组:对照组(Control),慢病毒空白对照组(CON+shRNA-GFP),Nogo-A低表达对照组(CON+shRNA-Nogo-A),PD认知正常组(PDCN),PD轻度认知障碍组(PDMCI),Nogo-A低表达+PD认知正常组(PDCN+shRNA-Nogo-A),Nogo-A低表达+PD轻度认知障碍组(PDMCI+shRNA-Nogo-A)。再通过伊文思蓝渗透性实验、FITC-Dextran染色、透射电镜、免疫荧光和Western blot(WB)分析。采用重复测量方差分析(包括分组因素和天数因素)来比较各组小鼠水迷宫的逃逸潜伏期;采用单因素方差分析(One-way ANOVA)法比较各组组间差异。结果:(1)Morris水迷宫结果显示,与Control组相比,PDCN、PDMCI组小鼠空间认知和记忆显著受损(P<0.05);沉默Nogo-A后,PDMCI+shRNA-Nogo-A组小鼠与PDMCI组相比,其逃逸潜伏期更短、平台所在象限区域逗留时间更长、穿过平台次数更多,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)伊文思蓝渗透性实验、FITC-Dextran染色、透射电镜结果显示,PDCN、PDMCI组可见微血管密度明显减少、血管内皮细胞微结构破坏和血脑屏障受损,且PDMCI组损伤更严重,差异有统计学意义(P<0.05 vs Control);沉默Nogo-A后,PDCN+shRNA-Nogo-A组较PDCN组微血管损伤减轻、PDMCI+shRNA-Nogo-A组较PDMCI组损伤减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)免疫荧光和WB结果显示,与Control组相比,PDMCI、PDCN组CD34及VEGF蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),PDCN+shRNA-Nogo-A组较PDCN组表达增高、PDMCI+shRNA-Nogo-A组较PDMCI组表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与Control组相比,PDCN、PDMCI组小鼠脑内Nogo-A、S1PR2、RhoA、ROCK蛋白表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);沉默Nogo-A后,PDCN+shRNA-Nogo-A组小鼠中S1PR2、RhoA、ROCK蛋白表达较PDCN组表达减少,上述蛋白在PDMCI+shRNA-Nogo-A组中的表达也低于PDMCI组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MPTP可引起小鼠认知功能和微血管损伤,Nogo-A与S1PR2受体结合可激活下游RhoA/ROCK信号通路参与抑制PDMCI小鼠微血管再生。沉默Nogo-A表达可有效改善PDMCI小鼠认知功能、减少血脑屏障破坏、降低微血管损伤及促进微血管再生,该研究为PDMCI的机制阐述和临床精准治疗提供了有力的证据支持。