hNUDC促进巨核细胞系的增殖和分化

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本论文首次采用小鼠骨髓来源的巨核细胞作为研究对象,体外观察hNUDC对于小鼠骨髓细胞巨核的增殖和分化。结果显示,在半固体培养基中hNUDC可明显促进小鼠骨髓中巨核细胞集落生成单位(Colonyformingunitofmegakaryocyte,CFU-MK)的生成;在液体培养基中hNUDC可明显促进小鼠骨髓中巨核细胞成熟。流式细胞仪测定和免疫荧光染色,进一步确证了hNUDC可显著增加小鼠巨核细胞CD41+和CD61+细胞的百分含量和细胞核的多倍体化,且hNUDC刺激产生的巨核细胞核多倍体的含量明显高于TPO。   除了观察hNUDC对于小鼠骨髓细胞的增殖和分化以外,本论文还研究了hNUDC对于人脐血和外周血来源的CD34+细胞的增殖和分化作用。结果显示,在无血清甲基纤维素半固体中,hNUDC能够促进CD34+细胞分化增殖形成CFU-MK集落。hNUDC还可显著增加巨核细胞表面标志物CD41+的表达,并且刺激产生高倍性的巨核细胞显著地多于TPO。hNUDC对人前血小板形成的作用与对小鼠巨核细胞的作用相同。   为了进一步确定hNUDC对巨核细胞发育的功能及其机制,使用间接免疫荧光染色方法进一步确证了hNUDC在人和小鼠巨核细胞的不同发育阶段和前血小板阶段的表达情况。结果清楚地显示,hNUDC能够特异地与Mpl受体相结合,并且hNUDC还分布于巨核细胞和血小板内含颗粒中的微管上。   总之,本论文的结果明确证明了hNUDC可以激发许多与TPO相同的生物反应。TPO主要作用于巨核细胞分化的早期阶段,而hNUDC主要作用于巨核细胞分化的晚期阶段。尽管hNUDC作为TPO-/-基因敲除小鼠的残余血小板水平的补偿机制,被独立激活的途径还没有研究清楚,但是目前的研究发现,hNUDC作为Mpl的第二配体,在巨核系的发育成熟和血小板的生成中的确具有重要的作用。   
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