研究目的：　　 本研究通过建立脓毒症小鼠急性肺损伤模型，测定各组小鼠肺组织含水量、肺组织Toll样受体4mRNA(Toll like receptor4 mRNA,TLR4mRNA)的表达、炎症因子TNF-a和IL-6的表达，观察肺组织病理形态学的变化；探讨TLR4单克隆抗体(TLR4mAb)对脓毒症小鼠肺脏的保护作用及其可能的机制。　　 材料与方法：　　 1、实验分组　　 健康雄性BALB/c小鼠45只(体重19～23g)，随机分成对照组(15只)、脓毒症组(15只)和治疗组(15只)。用腹腔注射给药方法，脓毒症组注射脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)5mg/kg；治疗组注射LPS5mg/kg+TLR4mAb100ug/只；对照组注射等量生理盐水。各组动物按照观察时间点平均分为造模后6h、12h和24h各3个亚组。　　 2、模型制作　　 用0.1％的戊巴比妥钠4ml/kg作腹腔内注射麻醉后，将小鼠于仰卧位固定。用腹腔注射给药方法，注射LPS5mg/kg，制备脓毒症急性肺损伤模型。　　 3、检测指标和方法　　 在造模后6h、12h和24h时点处死相应实验组的小鼠，快速分离右肺中叶组织，测定其肺组织含水量。快速分离右肺下叶经4％多聚甲醛固定12～16h，制成石蜡切片，H.E染色，光学显微镜下观察标本形态学变化。分离左肺组织，应用RT-PCR方法检测TLR4mRNA的表达。分离右肺上叶，组织切块(约1mm×1mm×2mm)投入2.5％戊二醛固定液固定后，电镜观察。制备小鼠右肺上叶组织匀浆，检测炎症因子TNF-a。小鼠眼底静脉取血，离心取上清，检测炎症因子IL-6。　　 4、统计学处理　　 本研究的数据采取SPSS16.0软件包进行统计学处理，实验资料均以均数±标准差(x±S)表示；多组间比较用方差分析；对于不同处理组的两两比较，利用LSD-t法检验。以p＜0.05为差异具有统计学意义。　　 结果：　　 1、肺组织含水量　　 在6h时点各组肺组织含水量无显著差异(P＞0.05)；在12h和24h时点各组肺组织含水量，脓毒症组＞治疗组＞对照组，各组肺组织含水量有显著差异(p＜0.01)。　　 2、肺组织TNF-a表达的变化　　 在6h、12h和24h时点上，脓毒症组小鼠肺组织炎症因子TNF-a的表达高于治疗组(p＜0.01)和对照组(p＜0.01)；治疗组小鼠肺组织炎症因子TNF-a的表达高于对照组(P＜0.05)。脓毒症组和治疗组肺组织TNF-α的表达在6h达高峰，随后随着建模时间的延长，肺组织TNF-α的表达逐渐减少；同一组内各时点之间比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。　　 3、血清IL-6表达的变化　　 在6h、12h和24h时点上，脓毒症组小鼠血清炎症因子IL-6的表达高于治疗组(P＜0.01)和对照组(P＜0.01)；治疗组小鼠血清炎症因子IL-6的表达高于对照组(p＜0.05)。脓毒症组和治疗组随着建模时间的延长，小鼠血清炎症因子IL-6的表达逐渐增高，24h达到高峰；各时点之间比较，差异有统计学意义(p＜0.05)。　　 4、肺组织TLR4mRNA表达的变化　　 TLR4mRNA在肺正常组织中表达为0.304±0.03，在LPS诱导的脓毒症小鼠肺组织中的表达增加，6h达到高峰，为1.697±0.090，12h后有所下降，为1.280±0.083，到24 h已降低到0.913±0.093(p＜0.05 vs.对照组)。TLR4mAb可降低TLR4mRNA在脓毒症小鼠肺组织中的表达(p＜0.05 vs.脓毒症组)，在6h、12h、24h分别为1.201±0.053，0.921±0.049和0.404±0.051。　　 5、肺组织光镜下的变化　　 对照组小鼠在6h、12h和24h病理检测均无明显的肺损伤病理改变；脓毒症组小鼠在造模6h和12h右肺下叶组织病理改变主要为肺泡扩张不均匀，部分肺泡萎陷，肺泡壁增厚，肺泡壁毛细血管扩张、充血，间质多量多形核细胞浸润，随着时间的延长，病变程度可见加重；脓毒症组小鼠在造模24h右肺下叶组织除了上述病变外，还出现轻微的小气道损伤、轻微肺水肿及局部肺出血。治疗组小鼠在造模6h、12h和24h右肺下叶组织病理改变较模型组减轻。　　 6、肺组织电子显微镜下的变化　　 对照组肺部组织结构正常，肺泡上皮细胞形态常。脓毒症组肺泡上皮细胞内出现空泡、细胞器肿胀、细胞器溶解等坏死表现，以及核染色质边集、核碎裂、核膜破裂等凋亡表现；同时可见肺微血管基底膜增厚，细胞间隙水肿，肺泡壁增厚及毛细血管扩张，肺间质水肿，红细胞及中性粒细胞浸润等表现。随着建模时间的延长，上述表现逐渐加重，肺泡间隔增宽断裂，肺泡腔内大量的红细胞及中性粒细胞浸润。治疗组与脓毒症组相比，肺泡上皮细胞坏死和凋亡比例相对较少，肺水肿及细胞浸润现象相对较轻。　　 结论：　　 1.腹腔内注射LPS可成功建立脓毒症小鼠急性肺损伤模型。　　 2.TLR4、TNF-α、IL-6在脓毒症小鼠急性肺损伤的发生机制中起重要作用。　　 3.TLR4mAb可能通过阻断TLR4的信号转导作用，抑制炎症因子TNF-α、IL-6的表达而对脓毒症急性肺损伤具有一定的保护作用。