汉滩病毒囊膜糖蛋白G1和G2在大肠杆菌中表达及表达产物免疫原性研究

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汉滩病毒是一种有囊膜的单股负链RNA病毒,病毒的基因组由大、中、小三段RNA组成,大片段编码RNA聚合酶,中片段编码囊膜糖蛋白G1和G2,小片段片编码核蛋白。囊膜糖蛋白上有中和和血凝抗原位点,可诱导中和抗体和保护性细胞免疫反应;核蛋白上虽然没有中和抗原位点,但可诱导保护性细胞免疫反应。 本研究分别用三种不同大肠杆菌表达载体(PBV220、PKK223-3和PGEX-4T-4)构建了囊膜糖蛋白G1和G2的表达质粒,首先用PCR方法扩增G1和G2编码区基因,将PCR产物克隆到T-载体中,从T-载体克隆质粒中用不同的内切酶切下G1和G2编码区基因,分别克隆到三种表达载体中构建G1和G2的表达载体质粒,同时用缺失突变的方法构建两个分别含G1和G2氨基末端编码区基因的表达质粒。将表达质粒转化大肠杆菌TG1。
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