枳壳总黄酮提取与分离纯化工艺研究

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枳壳为芸香科柑橘属植物酸橙(Citrus aurantium L.)及其栽培变种的干燥未成熟果实,主产于江西、四川,尤以江西清江、新干产区闻名,属于江西的地道药材。枳壳味苦、辛、酸、温,功能理气宽中,行滞消胀,其主要药用有效成分为黄酮类及挥发油类化合物等。药理毒理研究表明:枳壳总黄酮的毒性小,安全范围大,药用价值很高。本文采用超声波和微波辅助方法提取枳壳中总黄酮,实验分别考察了枳壳的样品粒径、溶剂的浓度、液料比、超声/微波功率和提取时间等因素对提取过程的影响。在单因素实验基础上,利用中心组合设计原理及响应面法(RSM)分析建立了二次回归模型,研究了各因素及其交互作用对枳壳提取得率的影响,对枳壳总黄酮提取工艺条件进行了优化。实验得出超声辅助提取枳壳总黄酮的最佳工艺条件为:枳壳颗粒度为60目,乙醇体积分数60%(v),超声波功率300W,超声辅助提取时间30min,液固比15:1。微波辅助提取枳壳中总黄酮的最佳工艺条件为:枳壳颗粒度为40目,乙醇体积分数为60%(v),液料比10:1,微波功率480W,微波辐射时间为4min。实验对大孔树脂分离纯化枳壳总黄酮的工艺条件进行了研究。通过静态吸附实验,比较了7种不同型号的大孔树脂对枳壳总黄酮的吸附性能,筛选出适合枳壳总黄酮分离纯化的大孔树脂。纯化结果表明,AB-8型大孔树脂不仅吸附量大,而且解析率高,适合用于枳壳总黄酮的纯化。经动态吸附实验可以得出AB-8型大孔树脂分离纯化枳壳总黄酮的最佳工艺参数为:上样浓度为0.408mg/ml,上样速率2BV/h,pH=4。用6BV的体积分数为75%乙醇以1BV/h的流速进行洗脱,可基本将枳壳中总黄酮从AB-8型树脂上解析下来,回收率可以达到94.85%。实验采用规格为(Φ3.0cm×60cm)玻璃层析柱对枳壳总黄酮进行纯化,装柱高度为34cm,即1BV(柱床体积)约为240mL。在上述条件下进行上样和洗脱,所得枳壳总黄酮纯度由原来的14.03%提高到了42.54%。实验还对枳壳黄酮组分的分离进行了探索研究。
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