【摘 要】
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本文以转ALO基因烟草的T2代种子为材料并以野生型为对照,通过分析铝毒胁迫下转基因烟草植株体内抗氧化系统的变化,进一步探讨ASA在转ALO基因烟草中的抗铝毒作用。结果表明: 1
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本文以转ALO基因烟草的T2代种子为材料并以野生型为对照,通过分析铝毒胁迫下转基因烟草植株体内抗氧化系统的变化,进一步探讨ASA在转ALO基因烟草中的抗铝毒作用。结果表明:
1.用PCR检测表明ALO基因是还稳定在烟草T3代基因组内。
2.对T3代转基因烟草离体叶片喂饲ALO底物半乳糖醛酸内酯(GL),能提高还原型ASA含量和总ASA的含量。
3.铝处理下,野生型的根长和生长量均受到明显的抑制,而转基因烟草没有受到明显的影响。
4.分别测定抗氧化物质的含量和抗氧化酶活性,转基因烟草无论是在正常生长条件下,还是在逆境胁迫的条件下,在铝胁迫的过程中ASA和GSH含量均比野生型高,但是SOD、CAT和APX活性却与野生型没有明显的差异。
5.在受铝胁迫的条件下,野生型比转基因株系积累更多的H<,2>O<,2>的含量和膜脂过氧化程度比转基因株系要大,其产物MDA含量也多。说明了野生型受铝毒胁迫较转基因株系的大,对叶片细胞膜透性影响也大,相对电导率增高。
6.采用mRNA差异显示法结合银染的方法初步分离出7个烟草半乳糖醛酸内酯(GL)响应基因,为ASA的耐铝毒作用的分子机理提供一定基础。
因此,本实验结果表明转基因具有较高的ALO活性,提高了叶片的ASA含量。ASA含量的增加,提高了烟草抗铝毒胁迫的能力,其原因并不是通过提高抗氧化酶的活性来清除铝胁迫产生的活性氧,而是通过提高了ASA和GSH对活性氧进行直接清除能力,从而提高了抗铝毒能力。
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