黄秋葵(Abelmoschus esculentus(L.)Moench):中文学名咖啡黄奎,别名秋葵。原产地位于埃塞俄比亚南部,近几年在我国南方比较多见。其果实可以供人们食用,根据颜色可分为绿色和红色两类,口感娇脆鲜嫩肉汁量高,纯润而不腻,味道独特,其种子可作为榨油原料。黄秋葵营养价值高,近年来成为家喻户晓的保健蔬菜。黄秋葵种子也具有很高的利用价值,其蛋白质含量可达28%左右,含有丰富脂肪酸,尤其不饱和脂肪酸含量所占比例较高。咖啡碱具有抗氧化,抗疲劳,提高记忆力以及抗癌等作用。国内黄秋葵种子多为榨油所用,利用率较低。开发黄秋葵种子中的咖啡碱可提高种子的利用率,以此为基础研究功能型保健食品,有利于提高人体免疫力,达到预防疾病的目的。本文主要针对黄秋葵种子中的咖啡碱,通过超声波辅助、乙醇加热回流的方式进行浸提。在单因素试验的基础上,经Box-Benhnken中心组合试验设计29组优化试验,通过方差分析得出了最佳提取工艺条件为:提取时间4h,乙醇体积分数79%,提取温度86℃,料液比1:20,在此条件下咖啡碱实际得率为1.04mg/g,并经过重复性试验验证,其重复性良好。在此基础上,以黄秋葵种子咖啡碱粗提物为原料,对其进行抗氧化活性研究。体外分别对还原能力和DPPH,羟自由基,超氧阴离子三种自由基的清除能力进行了研究。试验结果显示,伴随咖啡碱样品浓度的增加,其还原力和3种自由基清除能力都呈逐渐上升趋势,具有剂量依赖关系。在样品浓度为4mg/mL时,其对羟自由基和超氧阴离子的清除率分别达到60.12%和71.62%。样品浓度为10mg/mL时,其还原力和DPPH清除能力分别达到0.752和51.75%,总体抗氧化能力和还原力较好。针对得到的黄秋葵种子咖啡碱粗提物,先后经过D101型大孔吸附树脂和高效液相色谱法进行分离纯化。在吸附条件为上样量40mL,吸附流速1mL/min的情况下,吸附率达到69.26%。洗脱条件为乙醇体积分数80%,洗脱流速为1mL/min的情况下,解析率达到68.32%。通过高效液相色谱法进行分析,手动收集咖啡碱对应峰组分,得到分离后的咖啡碱样品。最后通过高效液相色谱,电喷雾电离质谱对分离后的样品进行分子量测定,结果显示其高效液相色谱保留时间均与咖啡碱标品一致,质谱测定分子量为194.1,与咖啡碱分子量相符,确定了经提取分离纯化后的物质为咖啡碱。本文旨在提高黄秋葵种子的利用价值和经济性,为以黄秋葵种子为原料开发功能性保健食品提供参考。