慢性HCV感染与LA-DRB1~*1301,1302等位基因的相关性研究

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背景与目的 HCV感染的显著特征是慢性化率很高。一些肝外组织可能成为HCV的储存场所,不利于彻底清除病毒。进一步探讨肝外细胞尤其外周单个核细胞(PBMC)的HCV感染对丙型肝炎慢性化有重要意义。现代研究认为慢性丙型肝炎肝脏组织损伤主要是由于机体免疫应答所致,宿主免疫应答的高低决定着丙型肝炎的发生和发展。由于人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)复合体可以调控机体免疫应答,所以HLA复合体与HCV感染之间的关系日益受到重视。HLA-Ⅰ类和Ⅱ类抗原分别是CD8和CD4分子的配体,可稳定和促进免疫细胞间相互结合、增强免疫应答的启动或效应功能,与抗HCV免疫反应有着密切的关系。某些特殊的HLA基因型可能影响着HCV感染后机体免疫的强弱,从而影响丙型肝炎的发生和发展。新近研究表明HLA-Ⅱ抗原HLA-DRB1*1301,1302在乙型肝炎病毒清除中发挥重要作用,探讨HLA-DRB1*1301,1302基因对慢性HCV感染及其慢性化的影响有重要意义。 方法 根据Gene Bank提供的序列,oligo软件PRIMER分析进行引物设计,采用套式PCR检测血清及外周单个核细胞(PBMC)中HCVRNA,产物进行琼脂糖凝胶电泳,用DNA Marker为分子量标准,确定PCR扩增产物的大小和扩增特异性。采用酚-氯仿法从血液中提取基因组DNA,利用计算机软件自行设计HLA-DRB1*1301,1302特异性引物,根据人工合成的引物,进行PCR扩增,对慢性丙型肝炎患者进行HLA-DRB1*1301,1302的检测,,然后提纯进行测序分析。采用SSPS11.0软件进行统计学分析。 结果61例慢性丙型肝炎患者中血清HCVRNA阳性41(67.2%)例,PBMC-HCVRNA阳性33(54.0%)例,二者有一定相关性(x2=18.32 P=0.000<0.05);
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