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[研究背景及目的]前列腺癌是泌尿外科最常见的恶性肿瘤之一,在欧美国家,其发病率居男性恶性肿瘤之首,死亡率仅次于肺癌,在我国,前列腺癌发病率呈逐年上升趋势。前列腺癌患者早期无明显症状,近一半患者初诊时已发生远处转移,丧失根治手术机会。目前针对转移性前列腺癌临床首选雄激素剥夺治疗,但大多数患者雄激素剥夺治疗后2年左右转变成转移性去势抵抗性前列腺癌。而针对转移性去势抵抗性前列腺癌患者临床有效治疗方法有限,患者预后也差。成为临床治疗难题。因此,深入研究和探讨前列腺癌转移的分子机制,找到新的分子标记物或治疗靶标,是当前的一个研究热点。这些科研成果也将加强和促进临床问题的解决。我们结合网络数据库以及自己实验中的发现,想通过已有的分子生物学研究方法,深入发掘转移性前列腺癌细胞中EN1调控的关键靶基因,构建EN1基因表达调控网络,并阐明其分子机制。为临床治疗转移性前列腺癌提供新思路。[方法]1.对来自美国纽约“纪念斯隆-凯特林癌症中心(MSKCC)和匹兹堡大学的2个的前列腺癌样本库mRNA表达谱芯片分析EN1在前列腺癌转移灶中的表达水平,比较转移性前列腺癌与局限性前列腺癌中EN1的表达差异。2.通过小室侵袭实验及基质胶3D培养实验,观察EN1的表达差异对C4-2和PC3细胞迁移及侵袭的影响。通过原位移植瘤动物模型实验研究EN1差异性表达对前列腺癌细胞转移能力的影响。3.结合GSEA数据库及JASPAR数据库资料,寻找可与转录因子EN1结合的特定位点以及可能基因。并通过双荧光素酶报告基因系统验证它们之间的关系。4.利用GSEA生物信息学富集,分析临床TCGA数据库中EN1与NF-κB信号通路激活的相关性。并探索EN1是否通过TR4/EZH2或其他因子激活NF-κ B信号通路,并研究EN1差异性表达与前列腺癌细胞株NF-κB信号通路激活的相关性。[结果]1.EN1在转移性前列腺癌中的表达水平较癌旁组织以及局限性前列腺癌高。2.敲低转录因子EN1可抑制前列腺癌细胞转移能力。动物实验显示敲低转录因子EN1可抑制PC3细胞体内肿瘤转移。3.前列腺癌中EN1与TR4的表达呈正相关,TR4与EZH2的启动子区结合,促进mPCa细胞侵袭及迁移。4.分析TCGA数据库中前列腺癌样品的mRNA表达谱,发现EN1表达上调与NF-κB信号通路激活显著相关。[结论]转录因子EN1可能通过转录调控TR4/EZH2,介导NF-κB信号通路激活,从而诱导前列腺癌细胞转移。