本试验通过采集四川各地存在呼吸道症状的保育猪的血清(未注射副猪嗜血杆菌与猪2型链球菌疫苗),旨在对近年来严重影响我国养猪业发展的副猪嗜血杆菌病与猪2型链球菌病的血清流行病学情况进行调查,为预防和控制副猪嗜血杆菌(Hps)病与猪2型链球菌病提供一定的流行病学依据。将筛选出的副猪嗜血杆菌5型(Hps 5型)与猪2型链球菌(Ss2)疫苗菌株制备成二联蜂胶灭活苗,并进行免疫抗体及免疫保护力评价实验。结果如下：1.副猪嗜血杆菌与猪2型链球菌血清流行病学调查本试验采用ELISA检测试剂盒对2015年2月至2016年1月从四川多地采集的180份保育猪血清进行抗体检测。其中,Hps抗体阳性率为55.6%(100/180)；西昌、绵阳、成都、眉山等地感染率较高,分别为85.7%(6/7)、83.0%(44/53)、77.8%(14/18)、66.7%(4/6)。Ss2血清抗体阳性率为29.4%(53/180)；阿坝、雅安、宜宾等地感染率较高,分别为54.2%(13/24)、50%(4/8)、48.7%(19/39)；Hps与Ss2混合感染百分率为17.2%(31/180)。表明四川地区Hps与Ss2混合感染情况较为明显。2.疫苗株的筛选通过对11株Hps 5型菌株进行毒力及免疫原性比较试验,确定疫苗菌株为82号,编号Hps82；通过对17株Ss2进行毒力及免疫原性比较试验,确定疫苗菌株为PZ903,编号Ss903。3.Hps与Ss2二联蜂胶灭活苗的初步研制灭活疫苗株Hps82与Ss903菌株的最佳甲醛灭活浓度确定为0.1%,灭活时间均为24 h。制备的Hps 5型与Ss2二联蜂胶灭活苗中Hps82含菌量为4.0×109CFU/ml,Ss903含菌量为2.0×109 CFU/ml。制备的灭活苗经皮下免疫试验小鼠两次(一免后一周二免),在小鼠上能产生良好的免疫保护力,同时能在4℃至少保存3个月。4.二联蜂胶灭活苗与市售疫苗的对比试验将制备的Hps5型与Ss2二联蜂胶灭活苗与市售Hps灭活疫苗(中牧生物科技有限公司)和市售Ss2灭活疫苗(广东永顺生物制药股份有限公司)分别免疫小鼠进行比较,结果显示：制备的二联蜂胶灭活苗在小鼠上的保护效果与市售Hps疫苗和Ss2疫苗基本相当,且本试验制备的Hps与Ss2二联蜂胶灭活苗可以减少免疫次数带来的应激反应。