GSH耗竭在芹菜素诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡中的作用

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目的研究芹菜素(apigenin,API)诱导人胰腺癌PANC-1细胞凋亡作用,并探讨细胞内谷胱甘肽(glutathione, GSH)耗竭是否参与其诱导细胞凋亡作用。方法不同浓度API(20.0、40.0、80.0μmol/L)处理体外培养胰腺癌PANC-1细胞。碘化丙啶(propidium iodide, PI)染色流式细胞术(flow cytometry, FCM)分析细胞凋亡率;酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞组蛋白/DNA碎片水平。Hoechst33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态改变。分光光度法测定细胞内GSH含量。结果PI染色FCM结果表明,API(20.0、40.0、80.0μmol/L)孵育24h,胰腺癌PANC-1细胞凋亡率逐次增加(P<0.05),呈剂量依赖性。ELISA测定结果显示,API(20.0、40.0、80.0μmol/L)显著诱导胰腺癌PANC-1细胞组蛋白/DNA碎片增加(P<0.05)。Hoechst33258染色荧光显微镜观察发现API(20.0、40.0、80.0μmol/L)导致胰腺癌PANC-1细胞的典型凋亡形态学变化,例如细胞核固缩、核碎裂等;同时,细胞凋亡指数以浓度依赖方式增高(P<0.05)。分光光度法测定结果证明,API(20.0、40.0、80.0μmol/L)作用3h,胰腺癌PANC-1细胞内GSH含量随药物浓度增高逐次降低(P<0.05)。此外,外源性GSH预孵育能对抗API诱导PANC-1细胞GSH耗竭作用;并能有效阻断API诱导细胞凋亡率和组蛋白/DNA碎片增加效应。结论1. API具有诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡作用,呈浓度依耐性。2. API诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡与其耗竭细胞内GSH相关。
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