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实现复杂基质中农药残留高灵敏、高通量的检测一直是环境分析工作者研究的重点。分子印迹聚合物(Molecularly imprinted polymers,MIPs)技术集分离富集于一体、能够专一性地识别目标物、价格低廉,已成为样品前处理技术中的研究热点。荧光光谱分析法(Fluorometric Analysis)因其灵敏度高、重现性好等优点而受到广泛关注,但选择性差的缺陷限制了其在复杂样品中的应用。流式细胞术是一种多参数、高通量的检测方法,现已广泛应用于生物等样品的分析中。分子印迹—荧光编码微球—流式细胞术联用一方面可利用分子印迹从复杂基质中专一识别目标物的优势,另一方面可利用荧光分析高灵敏度的优点,还可以利用流式细胞术多参数、高通量的检测优势,从而可以实现复杂基质中农药残留的高灵敏、高通量检测。 本文首先合成聚苯乙烯种球(PS),并以阿特拉津为模板分子、甲基丙烯酸为功能单体、二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,利用多步溶胀法和单步溶胀法两种不同合成工艺合成印迹聚合物微球(MIPMs)。并考察了单步溶胀法中转速及交联剂用量对MIPMs形貌的影响。通过红外光谱(FTIR)、扫描电镜(SEM)考察PS、MIPMs的结构及形貌。本文合成的PS微球与红外谱库中PS微球相似度99.9%;两种溶胀法合成的MIPMs结构相同。考虑到合成时间、形貌等因素最终选择单步溶胀法作为本文的合成方法。在单步溶胀法中转速为150rpm、模板分子:功能单体:交联剂的摩尔比为1∶4∶8时,MIPMs形貌最佳。 依据上述合成方法及条件合成了克百威印迹微球,并以合成的微球为固相萃取材料做成分子印迹固相萃取柱(MISPE)。通过SEM、吸附平衡实验和竞争吸附实验分析了克百威MIPMs的形貌、对克百威的结合特性及吸附选择性,并比较了克百威MISPE与C18固相萃取柱(C18 SPE)富集水中克百威的效果。结果表明:本实验所合成的MIPMs粒径约10μm,表面呈蜂窝状;在90 min内可达到饱和吸附,最大吸附量为25.94 mg/g;在克百威、灭多威和三羟基克百威共存的条件下,克百威MIPMs可实现对克百威的专一性吸附;与C18 SPE对水中克百威的回收率相比,克百威MISPE重复使用6次的加标回收率仍在85%以上。此MISPE可用于水体中痕量克百威的检测。 利用合成的阿特拉津、毒死蜱MIPMs作为荧光编码微球的载体,采用溶剂逐步挥发法将发光波长为525 nm和625 nm的油溶性CdSe/ZnS量子点(QDs)编码到这两种MIPMs上,合成525 nm、625 nm QDs@MIPMs。通过荧光分光光度计优化MIPMs与QDs的用量比,通过吸附平衡实验考察了QDs@MIPMs与MIPMs吸附性能的差异,利用流式细胞仪实现525 nm、625 nmQDs@MIPMs同时检测。结果表明,每20 mg的MIPMs与200μL8μM CdSe/ZnS QDs即可合成高荧光强度的QDs@MIPMs; QDs@MIPMs与MIPMs对模板分子的吸附几乎相等;525 nm、625 nm QDs@MIPMs在流式细胞仪不同通道内中可被同时检测出来,通过建立荧光补偿方案减小彼此带来的荧光信号的干扰。 最后,初步建立水中毒死蜱的流式分析方法并考察了草莓汁、西红柿汁、茼蒿汁三种果蔬基质中色素对625 nm QDs@MIPMs在流式细胞仪各荧光通道中的干扰情况。结果显示,625 nm QDs@MIPMs与水中毒死蜱浓度成线性负相关关系;这三种果蔬基质对流式分析荧光编码微球几乎无影响。